5－二咖啡酸酰奎尼酸-上海市药学会.ppt

* 注射液指纹图谱 指纹图谱1 指纹图谱2 1、新绿原酸； 2、绿原酸； 3、隐绿原酸； 4、咖啡酸； 5、3，4’－二咖啡酸酰奎尼酸 6、3，5’－二咖啡酸酰奎尼酸 7、4，5’－二咖啡酸酰奎尼酸； 8、连翘酯苷D； 9、野黄芩苷 1、野黄芩苷； 2、黄芩苷； 3、千层纸素-7-O-葡萄糖醛酸苷 4、白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷 * 注射液指纹图谱 指纹图谱4 1、天冬氨酸； 2、谷氨酸； 3、丝氨酸； 4、甘氨酸； 5、苏氨酸； 6、丙氨酸； 7、缬氨酸； 8、苯丙氨酸； 9、异亮氨酸； 10、亮氨酸； 11、脯氨酸 熊去氧胆酸 鹅去氧胆酸 可指认成分达到 明确结构成分的93％ 指纹图谱3 * 在多指标( s，a，b，…) 质量评价时，以某一典型有效成分作为内参物( s) ，建立内参物与其它待测成分( a，b，…） 间的相对校正因子( RCF，fsa，fsb…) 通过相对校正因子达到测定一个成分( 对照品可得到者)的同时 , 可计算出其它待测有效成分的含量 什么是“一测多评”（QAMS）？ 一测多评技术在中药质量控制中的应用 * 采用“一测多评”的理由： 物质基础研究表明： 具有7种有机酸类：金银花提取物中含绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、新绿原酸、4，5－二咖啡酸酰奎尼酸、3，4－二咖啡酸酰奎尼酸、3，5－二咖啡酸酰奎尼酸共7种有机酸 标准品的缺乏：除咖啡酸和绿原酸具有标准品外，其余标准品缺乏 具有绿原酸的母核：除咖啡酸外，其余6种有机酸结构类似，均具有绿原酸的母核 含量范围相近：含量范围为0.02～0.07mg/ml 金银花提取物中总有机酸含量的主要方法学研究（案例2） 内参物的选择依据：具有相同母核的有机酸---绿原酸 * 波长的选择（金银花中的有机酸类最大吸收波长均在325nm ） 流动相组成的考察 流动相梯度的考察 柱温及流速的考察 不同色谱柱的考察 不同仪器的考察 时间 （分钟） 流动相A（％） 乙腈 流动相B（％） 0.1％甲酸 流速 （ml/分钟） 0～20 5→10 95→90 0.8 20～30 10 90 0.8 30～35 10→18 90→82 0.8→1.0 35～60 18 82 1.0 方法中明确了色谱柱等可能影响相对保留时间的因素 方法允许流动相比例可以调节，并保证分离效果，以适应中药材批次间的合理差异 HPLC 分析方法的研究 * 金银花提取物高效液相色谱图 新绿原酸 绿原酸 隐绿原酸 咖啡酸 3，4’－二咖啡酸酰奎尼酸 3，5’－二咖啡酸酰奎尼酸 4.5’－二咖啡酸酰奎尼酸 金银花提取物色谱峰指认 金银花提取物中有机酸类成分占28％-39％ * 相对校正因子的确定 新绿原酸 隐绿原酸 3，4－二咖啡酸酰奎尼酸 3，5－二咖啡酸酰奎尼酸 4，5－二咖啡酸酰奎尼酸 标曲1 0.972705 0.976662 1.210966 0.989562 1.109981 0.969858 0.980694 1.214659 0.991608 1.108442 0.974806 0.979967 1.216515 0.991888 1.089856 0.978463 0.982519 1.2124 0.988588 1.072472 0.980724 0.982698 1.209252 0.985758 1.062248 0.985066 0.983805 1.202637 0.974812 1.049078 1.003118 0.975104 1.144151 0.924648 1.000802 标曲3 0.938677 0.978821 1.227598 0.940728 1.059597 0.947288 0.984169 1.234761 0.937337 1.038846 0.951752 1.001544 1.223393 0.935362 1.026517 0.953044 0.979194 1.214085 0.92938 1.024854 0.951453 0.995456 1.211917 0.92408 1.013441 标曲2 0.91463 1.114414 1.199906 1.004648 1.126698 0.935693 1.121086 1.208441 0.993484 1.120812 0.990339 1.082614 1.210835 0.957829 1.13294 0.982203 1.069526 1.194141 0.945644 1.128001 0.993901 1.076368 1.186283 0.933524 1.110371 平均 0.97 1.02 1.