环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌的研究的中期报告.docx

环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌的研究的中期报告 该研究旨在开发一种快速、准确地检测志贺氏菌的环介导等温扩增技术。本报告为该研究的中期报告，介绍了研究的进展情况。 在研究前期，我们首先筛选了多个目标基因，包括rfbE、wzx、fliC和stx1等，用于设计引物。通过PCR反应和测序验证，我们最终选择了rfbE基因进行后续的实验。 接着，我们设计了一对特异性引物和一个特异性探针，用于扩增rfbE基因。该引物和探针的序列经过反复筛选，确保其与志贺氏菌rfbE基因特异性，不与其他细菌的基因序列相互干扰。 在基本反应体系优化过程中，我们发现，当扩增温度为62°C时，扩增产物的特异性和产量最佳。此外，我们还优化了反应体系中引物和探针的浓度，以及反应时间和温度等参数，以提高反应的敏感性和特异性。 最终，我们将优化后的环介导等温扩增反应体系应用于10份志贺氏菌和10份非志贺氏菌样品的检测，并进行了比较试验。结果表明，所有志贺氏菌样品均能够被检测到，并且没有假阳性样品。而在非志贺氏菌样品中，我们未检测到任何阳性样品，表明该方法具有非常高的特异性。 综上，我们成功地开发出了一种基于环介导等温扩增技术的快速检测志贺氏菌的方法。该方法具有高度的特异性和敏感性，可以在30分钟内准确地检测志贺氏菌的存在。我们将继续优化该方法，以提高其在临床医学和食品安全领域的应用前景。