降解原油微生物的筛选及其部分特性的研究.pdf

维普资讯 石 油 勘 探 与 开 发 2002年 12月 P rRoLEUM EXPIORATION AND DEVELOPMENT VO1．29 No．6 91 文章编号：1000—0747(2002)06—0091—03 降解原油微生物的筛选及其部分特性的研究 李清心 ，一，康从宝 ，一，王浩 ，张长铠 (1．山东大学微生物技术国家重点实验室；2．大庆石油学院) 基金项 目：山东大学微生物技术国家重点实验室资助项 目(审2000—068) 摘要 ：筛选得到4株可利用原油为碳源生长的菌株，初步鉴定为假单胞菌。这4株菌对原油有很好的降黏作用，它们能利 用长链烷烃生长，并且能耐受一定的温度、压力和矿化度。其中的M-3菌除降黏外还能产生酸和生物表面活性剂，在 以原 油为碳源的培养基 中进行培养时，可以使培养液的表面张力从72raN 降至36mN ，pH值从7．0降至约5、5。实验证 明M一3菌液在室内条件下能提高原油采收率8．8％左右，在微生物采油中有很好的应用潜力。图1表4参 19(李清心摘) 关键词 ：微生物采油；降黏；假单胞茵 中图分类号：TE357．9 文献标识码 ：A 微生物提高原油采收率(ME0Rl)技术在许多油田试 菌种活化后接人种子瓶。将 45℃培养 1d得到 的 验效果很好[L14]。筛选能以原油为碳源生长并能生成有 种子液接入装有不同盐浓度溶液的摇瓶中进行耐盐实 益产物的微生物，既节约成本，又延长作用时间[引，本文 验 ，培养数天后用平板计数法检查活菌数。将种子液 介绍对这类菌种的筛选结果及其作用效果。 加入高压容器 内，排净空气 ，密封后放入恒温水浴 中， 根据需要调节温度和压力 ，进行耐温、耐压实验 比较高 1实验材料和筛选结果 温 、高压培养前后菌数的变化。 1．1菌种来源及培养基 M_3菌提高原油采收率室内实验按文献[12]进行。 菌种来 自油 田产 出液 、含油废水及长期被原油污 1．3菌种筛选结果 染的土壤。3类培养基组成见表 1。 筛选得到4株 以原油为碳源生长较快的假单胞菌 属菌株 (编号为 M一1、M一2、M一3、M一4)，特征见表2。 表 1 微生物菌种培养基组成 培养基 培养基组成 (g／L) 表 2 菌体的表面形态特征及生理生化特征 富集培养基 NaN 0．2，NaH2 0．5,K2嘞 ．3H20 1．0 斜面培养基 蛋 白胨0．6，NaC10．5，酵母膏 0．2；pH值 7．2--7．4 酵母膏 0．1，葡萄糖 2．0。NaC10．5，(NH4)2SO40．1， 发酵培养基 I VlgSO4．7H200．025，KH2PO40．2，~HVO41．0；pH值 7．2 1．2筛选方法 将适量含油污水或土样接种于富集培养基 中，置 于45℃、100～120r／rain的摇床培养 7～10d，然后每天 取样涂原油平板，分离菌种，按 《简明第八版伯杰氏细 菌鉴定手册》进行菌种鉴定。 将筛选到的菌种接种于斜面培养基上培养 1～2d， 用无菌水制成菌悬液，接种 于富集培养基 中，置 于 45℃、100～150r／rain的摇床培养 2d，离心收集油相， 用 Brookfield数字黏度计测量原油 的黏度 。 用瑞典ThermoMetricAB公司制造的新型热导式 微量量热计 (热活性检测系统)检测 以烃类为唯一碳源 生长的菌种活性 1【6j。用Jzh