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稻瘟病菌T-DNA插入致病突变体筛选及分析的开题报告

题目：稻瘟病菌T-DNA插入致病突变体筛选及分析

背景介绍：

稻瘟病是稻米产量损失和农业生产中主要的病害之一。稻瘟病菌作为一种真菌病原体，对稻米产生严重的危害。为了解稻瘟病菌致病机理以及筛选防治稻瘟病的新方法，利用T-DNA插入技术进行致病突变体的筛选显得尤为重要。

研究目的：

本研究的目的是利用T-DNA插入技术进行稻瘟病菌致病突变体的筛选，并对突变体进行分析，以了解致病机理，为选择防治稻瘟病的新策略提供基础。

研究方法：

1.稻瘟病菌株的分离和鉴定

从稻田土壤和已感染稻株上分离得到稻瘟病菌株，通过形态学和分子生物学方法进行鉴定。

2.T-DNA插入

利用Agrobacteriumtumefaciens介导的T-DNA插入技术，构建T-DNA插入载体，并将其转化到稻瘟病菌中。

3.突变体筛选

利用抗性筛选和荧光筛选等方法，筛选到T-DNA插入致突变体。

4.突变体鉴定

通过PCR、Southernblotting和测序等方法，对突变体进行鉴定，确定T-DNA的插入位点和突变的基因。

5.突变体致病机理分析

通过生理生化、表型和遗传分析等方法，研究突变体的致病机理和在稻瘟病致病过程中的作用。

预期结果：

通过T-DNA插入技术的筛选和分析，预计能得到多个稻瘟病菌致病突变体，揭示致病机理和抗性机制，为防治稻瘟病提供新策略，对提高稻米产量和质量有重要的实际应用价值。

参考文献：

1.李静平,鲍垂楷,董家军.Agrobacterium介导法转化中遗传转化之T-DNA插入技术(稻瘟病菌)[J].中国农业科学,2006,39(3):611-616.

2.王建平,高峰.稻瘟病菌全基因组质粒pYT1插入T-DNA的构建及突变株筛选[J].软件学报,2005,16(2):187-193.

3.范凤云等.稻瘟病菌转化系统的建立及致病因子研究[J].生物工程学报,2008,24(6):1051-1055.