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黄曲霉素的检测
黄曲霉素的检测
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部分国家检验检疫要求
●1995年,世界卫生组织制定的食品黄曲霉毒素最高允许浓度为
15ug/kg.
●我国政府对各种食物中黄曲霉毒素的最高允许量见表2.
表2中国对食品中黄曲霉毒素的最高允许含量
食物名称
最高允许含量/(ug/kg)
玉米,花生,花生油,坚果和干果(核桃,杏仁)
玉米,花生仁制品(按原料折算)
大米,其他食用油(香油,菜籽油,大豆油,葵花油,胡麻油,茶油,麻油,玉
米胚芽油,米糠油,棉籽油)
其他粮食(麦类,面粉,薯干),发酵食品(酱油,食用醋,豆豉,腐乳制品),
淀粉类制品(糕点,饼干,面包,裱花蛋糕)
牛乳及其制品(消毒牛奶,新鲜生牛乳,全脂牛奶粉,淡炼乳,甜炼乳,奶
油),黄油,新鲜猪组织(肝,肾,血,瘦肉)
20(黄曲霉毒素b1)
20(黄曲霉毒素b1)
10(黄曲霉毒素b1)
5黄曲霉毒素b1)
0.5(黄曲霉毒素m1)
●美国联邦政府有关法律规定人类消费食品和奶牛饲料中的黄曲霉毒
含量(指b1+b2+g1+g2的总量)不能超过15ug/kg.人类消费的牛奶中的含量不能
超过0.5ug/kg,其他动物饲料中的含量不能300ug/kg.
●而欧盟国家规定更加严格,要求人类生活消费品中的黄曲霉毒素b1
的含量不能超过0.05ug/kg.
检验检疫方法
薄层层析法
薄层层析(thin-layerchromatography,tlc)是在黄曲霉毒素研究方面
应用最广的分离技术.自1990年,它被列为aoac(associationofofficial
agriculturalchemists)标准方法,该方法同时具有定性和定量分析黄曲霉毒素
的功能.
液相色谱法
液相色谱(liquidchromatography,lc)与薄层层析在许多方面具有相
似性,二者互相补充.通常用tlc进行前期的条件设定,选择适宜的分离条件后,
再用lc进行黄曲霉毒素的定量测定.
免疫化学分析方法
利用具有高度专一性的单克隆抗体或多克隆抗体设计的黄曲霉毒素的
免疫分析方法,也是最常用的黄曲霉毒素检测方法.这类方法通常包括放射免疫
分析方法(radioimmunoassay,ria),酶联免疫法(enzyme-linkedof
immunosorbentassay,elisa)和免疫层析法(immunoaflinitycolumn
assay,ica).它们均可以对黄曲霉毒素进行定量测定.
(1)免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-hplc法
免疫亲和柱法和酶联免疫吸附法虽然都可达到速简便效果,但酶联免疫
吸附法仅能检测单一毒素(如黄曲霉毒素b1)含量,而且易出现假阳性结果,难以
控制.免疫亲和柱法(包括荧光光度法和hplc法)却能达到既定量准确又快速简
便的要求.
免疫亲和柱的使用可以避免传统tlc和hplc的缺点,同时免疫亲和柱
与tlc和hplc法结合可以大大提高工作效率,提高灵敏度和准确度.
黄曲霉毒素免疫亲和柱-荧光光度计法是以单克隆免疫亲和柱为分离手
段,用荧光计,紫外灯作为检测工具的快速分析方法.它克服了tlc和hplc法在
操作过程中使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物和在样品预处理过程中使用多
种有毒,异味的有机溶剂,毒害操作人员和污染环境的缺点.同时黄曲霉毒素免疫
亲和柱-荧光光度计法分析速度快,一个样品只需10-15min,比传统方法快几