现代生物分析技术2.ppt

（三）准确度（Accuracy） 表示分析结果与真实值接近的程度。一般用回收率（％）表示。 组分含量为1%时，回收率应接近100%。痕量分析时，回收率一般应在85%－115%范围内，在LOD附近应在80%一120％范围内。 * 回收率= (加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%. 加标量不能过大,一般为待测物含量的0.5～ 2.0 倍, 且加标后的总含量不应超过方法的测定上限；加标物的浓度宜较高, 加标物的体积应很小，一般以不超过原始试样体积的1%为好；要求至少测定高、中、低三个浓度，每个浓度测定三份，提高9个数据进行评价，计算回收率和相对标准偏差（RSD）。 * * （四）检出限（Limit of Detection，LOD） 也叫灵敏度（sensitivity），是指试样中被测物能被可靠检测出的最低浓度或量。 一般以信噪比（S/N）为3：1或2：1时相应浓度或注入仪器的量进行确定。 提高灵敏度的方法：仪器、实验条件、富集待测组分等。 * （五）定量限（ Limite of Quantitation，LOQ） 是指被测样品能被定量测定的最低量，它的测试结果应该具有一定的准确度和精密度。 一般以信噪比为10：1时相应浓度或注入仪器的量进行确定。 * （六）标准曲线 是指一组平行已知一定浓度的标志溶液，标准溶液浓度与某一物理量之间的关系，利用这种关系和待测样品物理量的读数来计算待测样品的物质浓度。 在正常情况下，此标准曲线应该是一条通过原点的直线，但在实际测定时，常出现某一、二点偏离直线的情况，这时用最小二乘方回归法绘制标准曲线，就能得到最合理的图形。 * 最小二乘法 最小——使所有误差的平方和达最小值；二乘——平方。 * 实例：腺苷对照品分析 图. 腺苷对照品溶液测定的标准曲线 浓度，μg/ml 峰面积，V*sec 9.68 305506 19.36 637397 29.04 968817 38.72 1309708 48.40 1645166 58.08 2007240 表. HPLC测定不同腺苷浓度的结果 * （七）线性与范围 线性：是指设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。回归方程相关系数r≥0.9900，决定系数r2应接近1。 范围：是指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。线性范围为测试浓度的80％～120％。 * LOQ: limit of quantitation LOL: limit of linearity * （八）耐用性 是指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。 典型的变动因素有：被测溶液的稳定性，样品提取次数、时间等； 液相色谱中典型的变动因素有：色谱柱、流动相组成与PH、柱温、流速、进样量、检测器温度等。 * 思考题 1、什么是定性分析、定量分析？ 2、分析方法需要验证哪些项目？ * 第二章 仪器分析基础 2.1 概述 2.2 分析方法验证 * 分析化学是研究获取物质的组成、含量、形态、结构等信息及其相关理论的科学； 20世纪40年代前：分析化学=化学分析； 越来越多的问题化学分析不能解决： 快速、实时检测方法？ 痕量分析方法？结构确定？ 分析化学包括化学分析和仪器分析两大部分。 2.1 概述 * 分析化学的许多不同的类别。 化学分析 例行分析 测定原理 具体要求 仪器分析 仲裁分析 定性分析 无机分析 分析任务 分析对象 定量分析 有机分析 结构分析 常量分析 (0.1g or 10mL) 样品用量 半微量分析 (0.01~0.1g or 1~10mL) 微量分析 (0.1~10mg or 0.01~1mL) * 按分析任务分类