血清碱性磷酸酶ALP测定.pdf
血清碱性磷酸酶ALP测定
1检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果
的准确。
2实验原理
本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础,所
采用的反应原理与反应式如下。
ALP
对-硝基苯磷酸盐+H2O对硝基酚+
磷酸
在上述反应中,对-硝基苯酚的生成速率与样本中碱性
磷酸酶的活力成正比。通过在405nm处监测吸光度的上升
速率,即可测得样本中碱性磷酸酶的活性。
3标本采集与处理:
3.1病人准备:无特殊要求。
3.2标本类型:标本最好是无溶血的血清。
3.3血清分离:应在收集后两小时内分离出来。避免使用含
EDTA或草酸盐的血浆。
3.4标本存放:2~3天内的活性损失:15~25℃保存:10%;
标本稳定性:4~8℃保存稳定7天;-20℃保存至少可稳定2
个月标本。如果分析延迟8小时以上,最好把血清冷藏。冷
冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。
3.5标本运输:常温条件下运输
3.6标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。
4实验材料:
4.1试剂:上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒(沪
食药监械(准)字2014第2400166号YZB/沪1546-40-2014)
4.1.1试剂组成
试剂1乙酸3.0mmol/硫酸锌1.5mmol/L
(R1):镁L
HEDTA3.0mmol/AMP缓冲液420mmol/L
L
试剂2对-硝基81.5mmolAMP缓冲液420mmol/L
(R2):苯磷酸盐/L
5.0mmol/L
HEDTA
4.1.2试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件
下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。试剂启用
后,在2~10℃避光的条件下可稳定14天。
4.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能
继续使用。
4.1.5注意事项:试剂中含有稳定剂,可能存在一定的刺激
作用或毒性,请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触,即用大
量清水冲洗。请勿吞服。
4.2校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的
ALP校准品对自动分析仪进行校准。
4.3质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
5仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子
ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪
6操作步骤
6.1样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位
置。
6.2试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积
等确认无误后方可进行测定。
6.3项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗
氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝
TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏
P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝
TBA-120生化分析仪操作规程。
7质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为
未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘
制质控图,判断是否在控。
8计算方法
以ALP复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围
内,仪器直接报告可靠的检测结果,以U/L报告。
9参考值范围
成年人
男性