《广东省铁皮石斛种苗繁育技术规程》.pdf
T/GDSMMXXXX—XXXX
广东省铁皮石斛种苗繁育技术规程
1范围
本文件规定了铁皮石斛种苗繁育过程中的环境及器具消毒、培养基制备、外植体前处理和表面消毒、
初代培养、芽增殖培养、芽伸长和壮苗培养、生根培养、炼苗和移栽、移栽后管理病虫害防治、包装、
运输和档案管理。
本文件适用于广东省区域内铁皮石斛种苗的繁育。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB5084农田灌溉水质标准
GB/T6001育苗技术规程
GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则
LY/T1000容器育苗技术
LY/T2700花木栽培基质
NY/T496肥料合理使用准则通则
NY/T1107大量元素水溶肥料
NY/T1276农药安全使用规范总则
NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程
DB37/T3852铁皮石斛培育指南组培育苗
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
铁皮石斛DendrobiumofficinaleKimuraetMigo
为兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumSw.)植物铁皮石斛。
铁皮石斛种子seedsofDendrobiumofficinale
铁皮石斛经过传粉受精,胚珠发育成种子。铁皮石斛种子很小,呈黄色,无胚乳。
外植体explant
参照NY/T2306。
消毒disinfection
参照NY/T2306。
灭菌sterilization
参照NY/T2306。
接种inoculation
参照NY/T2306。
增殖培养proliferationculture
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将诱导的不定芽接种到增殖培养基上进行培养,增殖出较多的不定芽
4环境及器具灭菌
准备室消毒
准备室地面用巴氏消毒液拖地消毒,空间喷洒75%酒精消毒,保持干净。
接种室消毒
接种室用紫外灯照射30min消毒。接种前开启超净工作台紫外灯20min~30min后方可进行操作。
超净工作台使用时用75%酒精擦拭台面清洁消毒。超净工作台内过滤膜定期检查,清洗,更换,并在使
用超净工作台过程中严格按照操作规程进行操作,确保超净工作台安全使用。
培养室消毒
培养室采用二氧化氯组培室专用消毒剂定期熏蒸消毒。
接种器械消毒
接种之前,接种的剪刀、镊子和解剖刀器械用报纸包好后高温高压进行消毒,接种过程中,在酒精
灯上灼烧或在高温消毒器内进行消毒。
5培养基制备
基本培养基的选择
选择MS培养基为基本培养基。
母液的配制
5.2.1配制培养基前,先配制培养基母液。大量元素配制10倍,二水氯化钙单独配制。微量元素配制
1000倍,有机元素配制100倍,铁盐配制200倍,具体参数见附录A。
5.2.2植物生长调节剂一般配制浓度为1mg/mL的母液,具体参数见附录B。
母液的保存
母液配制好后贴上标签,标签信息包括名称、配制时间、配制人、浓度、倍数,放入4℃冰箱保存
备用。使用前观察有无沉淀或长菌情况,若有异样,须及时重新配制。
培养基的配制
5.4.1准备
5.4.1.1实验材料:烧杯,玻璃棒,移液管,标签纸,记号笔,蒸馏水,洗耳球,钥勺,培养瓶,PH
试纸。
5.4.1.2实验试剂:配制的MS培养基母液。
5.4.1.3植物生长调节剂母液:6-BA,IBA,琼脂粉,蔗糖。
5.4.1.4调试仪器设备:移液器,电子天平,电炉,电磁炉,微波炉,灌装机,高压灭菌锅。
5.4.2称量
称取蔗糖30g/L,琼脂粉6g/L~7