转染EGFP的人羊膜上皮细胞侧脑室移植治疗阿尔茨海默病模型鼠的实验研究.pdf
转染EGFP的人羊膜上皮细胞侧脑室移植治疗阿尔
茨海默病模型鼠的实验研
引言
阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)是一种神经退行性疾病,
以智能衰退、认知障碍和神经系统功能退化为特征。虽然广泛研究了AD
的分子机制,但是至今仍没有有效控制或治愈AD的方法。干细胞移植技
术为AD的治疗提供了新的思路。人羊膜上皮细胞(humanamniotic
epithelialcells,hAECs)是一种优质的干细胞来源,具有良好的生物学特
性和潜在的治疗应用价值。本研究旨在探讨EGFP转染的hAECs在侧脑
室移植治疗AD模型鼠中的应用价值。
材料和方法
实验动物
使用11-13个月龄的C57BL/6J小鼠,共50只(雄性24只,雌性
26只)。其中25只作为正常对照组,25只为AD模型组。
AD模型制备
通过连续3天腹腔注射多巴胺神经元毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四
氢嘌呤(MPTP)20mg/kg加山莨菪碱(SCH23390)0.03mg/kg制备
AD模型。
干细胞移植
将EGFP转染的hAECs移植入AD模型小鼠侧脑室中。移植前在小
鼠尾静脉注射EDTA进行血液抽取,分离出单个核细胞。EGFP标记的
hAECs以5×10^6个/10μl的浓度加入PBS中,通过针头透过小鼠的侧
脑室进行移植。移植后对小鼠进行观察和评估。
行为学测试
Morris水迷宫测试和挖掘泥浆测试分别测试小鼠的空间学习和记忆。
免疫组织化学
用免疫组织化学方法检测小鼠脑组织中EGFP标记的hAECs数目
位置,以及神经元阿尔茨海默样改变。
结果
EGFP转染的hAECs可以成功移植到小鼠侧脑室中。移植后小鼠AD
模型的病理表现得到了改善,其行为学测试的成绩也得到了改善,此外,
小鼠脑组织中的EGFP标记的hAECs移植效果良好,可以显著减少神经
元阿尔茨海默样改变。
结论
EGFP转染的hAECs能够成功地移植到小鼠AD模型侧脑室中并产生
良好疗效。这为AD的治疗提供了一种新的思路,以及hAECs作为治疗
AD的干细胞来源的可行性。虽然还有很多问题需要解决,但是hAECs移
植治疗AD的前景非常广阔。