玉米晚报叶斑病菌的荧光标记(GFP和DsRed).ppt

* 转代四次后 转化子稳定性分析 三.转化子插入突变分析 转化子的生长特性 R1 R2 R3 R4 G1 G2 G3 G4 Cl 转化子在CM培养基的菌落形态 A B C D E F pH4.0 pH5.5 pH7.0 pH8.5 pH10.0 pH11.5 转化子R4、G2与野生菌株在PDA培养基的菌落直径测量 酸性 中性 碱性 转化子的产孢量、细胞壁降解酶 产孢量 纤维素降解酶 果胶酶 转化子的粗毒素、致病力 Cl R1 R2 R3 R4 G1 G2 G3 G4 Cl R1 R2 R3 R4 G1 G2 G3 G4 CK 转化子发酵液体培养基的滤液 离体叶片针刺粗毒素后的病斑症状 菌株编号 Cl R1 R2 R3 R4 G1 G2 G3 G4 CK 病情指数 59.6 52.3 30.5 10.7 59.4 53.4 58.2 33.5 56.7 0 转化子粗毒素产生的离体叶片病斑面积 转化子接种5 d后寄主的病情指数 转化子插入位点分析 转化子 长度(bp) Max score Max ident 基因注释 登录序列号 R 1 627 102 70% Pyrenophora teres f. teres 0-1 hypothetical protein, mRNA XM_003295948.1 R2 790 482 77% Pyrenophora tritici-repentis Pt-BFP ATP phosphoribosyltransferase XM_001933274.1 G1 522 231 81% Paracoccidioides brasiliensis Pb01 ATP phosphoribosyltransferase, mRNA XM_002788952.1 G4 1125 157 86% Sclerotinia sclerotiorum 1980 hypothetical protein (SS1G_04048) partial mRNA XM1 侧翼序列基因的比对 五.新月弯孢对玉米侵染过程 新月弯孢在感病材料中的侵染 G H I A B C D E F J 荧光显微镜下新月弯孢的侵染过程 感抗材料侵染间差异 D E F G C B A 扫描电镜下新月弯孢的侵染过程 抗病相关基因转录水平差异 沈135(R) 黄早四(S) 0h 6h 12h 24h 48h 72h 96h 0h 6h 12h 24h 48h 72h 96h PAL PR-1 PR-10 POX3 LOX ACT3 新月弯孢对玉米根部侵染 A B C D 五.玉米弯孢叶斑病抗病资源筛选 对441份玉米种质资源进行了抗弯孢叶斑病鉴定，共筛选出表现高抗玉米材料8份（京05、选6、运42291、黄5、赤黄32、自3303、37、5003） ，高抗、抗、中抗、感和高感的比例分别为1.81%、12.01%、16.78%、55.34%和14.06%。自交系中抗病的材料所占的比例小于地方的品种资源中抗病的材料所占的比例。 全文结论 通过农杆菌介导转化法成功将荧光蛋白基因（gfp和DsRed）转入新月弯孢基因组中，并优化了转化条件。 通过对转化子的致病性状（产孢量、细胞壁降解酶和毒素）等分析筛选获得与野生型菌株差异最小的转