HIV-1 Env特异性单克隆抗体的筛选与异型二价单克隆抗体的研究的中期报告.docx

HIV-1 Env特异性单克隆抗体的筛选与异型二价单克隆抗体的研究的中期报告 该研究以HIV-1 Env蛋白为抗原，选用基于单细胞的B细胞重组技术构建了一个人源化、完全二抗体库。通过ELISA筛选，从抗体库中通过多轮筛选和克隆扩增得到15株HIV-1 Env特异性单克隆抗体，包括6个中和抗体和9个非中和抗体。其中8株抗体的亲和力(Kd)为nP至pM级，对HIV-1 Env的特异性和亲和力得到了初步的验证。 在进一步研究中，我们将其中两株非中和抗体重组为异型二价单克隆抗体（bispecific antibody）。经SDS和Western blot检测，异型二价单克隆抗体的分子量分别为62kDa和66kDa。采用表面等离子体共振（SPR）技术评估其与HIV-1 Env抗原的亲和力和特异性，结果表明两株异型二价单克隆抗体的亲和力和特异性均优于其单链体（scFv），说明异型二价单克隆抗体的构成成功，并具有更优秀的功能特性。 目前已经开始对这两株异型二价单克隆抗体的中和和抗病毒效应进行进一步的体外和体内评价，希望能为HIV治疗和疫苗设计提供新的思路和方法。