农杆菌介导的水稻双基因共转化初步研究.PDF

28 核 农 学 报 　2009 ,23 ( 1) :28～32 　 J ournal of N uclear Agricultural Sciences ( ) 文章编号 2009 农杆菌介导的水稻双基因共转化初步研究 1 2 2 2 汪秀志 　张红宇 　汪旭东 　吴先军 ( 1 黑龙江八一农垦大学农学院作物系 ,黑龙江 大庆 　163319 ; 2 四川农业大学水稻研究所 , 四川 温江 　611130) 摘 　要 :利用农杆菌介导法将分别位于不同质粒上的 gus 基因和 np t Ⅱ基因按照 1 ∶1 和 1 ∶3 的浸染浓度混 合共转化粳稻品种鄂宜 105 和中花 12 种子胚诱导的愈伤组织 ,结果从 43 棵经潮霉素反复筛选的再生 植株中获得 2 1 棵共转化植株 。经 PCR 分析表 明 ,2 个基因的共转化率分别为 4737 %和 6000 % 。 Southern Blot 和 Western Blot 检测发现 , gus 基因已经整合到水稻基因组中并且表达 。遗传分析证实外源 基因在 T 中大多以孟德尔方式进行遗传 。本研究分析了影响转化率的几个因素如浸染菌量比例和品 1 种之间的关系 , 以期进一步提高共转化的效率 。 关键词 :水稻 ;共转化 ;农杆菌介导 A PRELIMINARY STUDY ON Agr obacterium Tumef aciensMEDIATED COTRANSFORMATION OF DOUBL E GENES IN RICE 1 2 2 2 WAN G Xiuzhi 　ZHAN G Hongyu 　WAN G Xudong 　WU Xianj un ( 1HLJ A ugust First L and Reclamation University , Daqing , Heilongj iang 　163319 ; 2Rice Research Institute of Sichuan Agricultural University , Wenj iang , Sichuan 　611130) Abstract : Gus and np t Ⅱgenes were constructed separately with their respective vectors and cotransformed into mature seed derived calli of j ap anica rice cultivars Eyi 105 and Zhonghua 12 with a strain dosage ratio of 1 ∶1 and 1 ∶3 respectively through A grobacterium tumef aciensmediated transformation . 2 1 transgenic plants contai