蔬菜农药残留的快速检测技术_培训课件.ppt

结果的表述计算 检测结果按公式计算： 抑制率(％)=[(△Ao-△At)／△Ao]×100 式中：△Ao---对照溶液反应3min吸光度的变化值； △At---样品溶液反应3min吸光度的变化值； 结果判定 结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 酶抑制率法注意事项 1. 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株(体)蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。 酶抑制率法注意事项 2.当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化△Ao值在0.3以上，即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照溶液3min的吸光度变化△Ao值0.3的原因：一是酶的活性不够，二是温度太低。 酶抑制率法注意事项 3.当吸光度大到无法读取时，说明测定液浑浊有干扰。 4.待测样品放入分光光度计速度的影响。待测样品加入底物后，应马上摇匀，放入测定仪，否则影响数据准确性。 酶抑制率法注意事项 5.比色杯的透光度影响。保持比色杯的清洁，使比色杯有好的透光度是减少检测误差的必要条件。比色杯可定期用乙醇进行清洗。 6.微量移液器的影响。微量移液器要专用，贴上标签，避免交叉使用造成试剂污染；试剂从试剂瓶吸出后，不能再放回瓶中，坚持只吸不进的原则，防止试剂污染。 酶抑制率法注意事项 7.药品配制过程中的影响。磷酸盐缓冲液的配置一定要用蒸馏水、纯净水或去离子水，不可使用矿物质水，否则在测量过程中干扰较大，影响准确性。 信仪科技PR-203-6T农药残毒快速检测仪 1.试剂制备 1.1缓冲液：将缓冲液试剂袋中的试剂倒入烧杯，溶于500ml蒸馏水中，溶解，混匀即可。室温保存。 1.2 酶试剂：目前提供的酶试剂已配成溶液可直接使用。0-5℃环境下保存。 信仪科技PR-203-6T农药残毒快速检测仪 1.3 显色剂：向标有“显色剂”的试剂瓶中用可调定量移液器加入25ml缓冲液，溶解、混匀即可。室温保存。 1.4 底物：向标有“底物”的试剂瓶中用可调定量移液器加入2.5ml蒸馏水，溶解、混匀即可。0-5℃环境下保存。 信仪科技PR-203-6T农药残毒快速检测仪 2. 仪器测试操作步骤： 2.1 待测试液的制备：用天平称取2g有代表性的果蔬样品（叶菜剪成1厘米左右见方的菜样，块根菜取1厘米见方表皮样品）放入三角瓶中，加入10ml缓冲液，用手振荡提取2分钟后用滤纸干滤，取出清液即为待测液。 信仪科技PR-203-6T农药残毒快速检测仪 2.2 对照溶液的测试：在1cm比色皿中，加入酶100μl，加入缓冲液2.5mL，用保鲜膜盖住比色皿口，用右手大拇指按住保鲜膜，食指托住比色皿的底部，拿起摇匀，再加入显色剂100μl,加入底物20μl，同样用保鲜膜盖住比色皿口，拿起摇匀，仪器强制归“100%”后立即放入仪器第一通道中，按下“对照”键进行测试。 信仪科技PR-203-6T农药残毒快速检测仪 2.3 样品溶液的测试：在比色皿中，加入酶100μl，加入待测试液2.5mL，摇匀，静置10分钟后，加入显色剂100μl，加入底物20μl，摇匀，仪器强制归“100%”后立即放入仪器比色皿池中，按下“样品”键进行测试。 信仪科技PR-203-6T农药残毒快速检测仪 2.4 测试结果的判读：样品的抑制率在40%-50%之间为可疑农残超标样品，抑制率大于50%为农残超标样品，抑制率≥40%的样品需要重复检验2次以上，如有必要时，可用气相色谱等方法作进一步确认。 台湾农药残毒快速检测仪（96孔）检测试剂的调配： 1. 缓冲剂：使用前每袋+1000mL蒸馏水，无需分装，室温保存； 2. 酵素：酵素（1瓶）+500mL的缓冲液，等完全混匀后分装在红色的15mL离心管中，每管10mL左右，分装成50管（每管可检验200个样品）。酵素须冷冻保存，理论上每瓶可检验10000个样品； 检测试剂的调配： 3. 混合液（呈色剂和受质）：呈色剂（1瓶）+500mL的缓冲液+受质（1瓶），等完全混匀后分装在蓝盖的15mL离心管中，每管10mL左右，分装成50管（每管可检验200个样品）。混合液须冷冻保存，理论上每瓶可检验10000个样品。 试剂使用方法： 使用时：将冷冻的试剂自然解冻（不可使用恒温箱快速解冻）到室温即可