柑橘黄龙病菌DNA两种提取方法的比较毕业论文.doc

毕业论文 题 目: 学 生: 学院: 农 学 院 专业班级: 指导教师: 辅导老师: 时 间: 2013 年 4月 至 20年 6月 ……………………………………………………………………………Ⅰ 中文摘要……………………………………………………………………………Ⅱ 外文摘要………………………………………………………………………Ⅲ 1.前言……………………………………………………………………1 2.材料与方法……………………………………………………………………………2 2.1供试材料…………………………………………………………………………2 2.2试剂及仪器……………………………………………… ………………………2 2.2.1主要试剂…………………… ………………………… …………………2 2.2.2主要仪器…………………………………… ……………… ……………2 2.3实验方法…………………………………………………………………………2 2.3.1病害样品的采集…………………………………………………………2 2.3.2CTAB法提取样品DNA………………………………………………………2 2.3.3碱裂/醇沉法提取样品总DNA……… ……………………………………2 2.3.4紫外分光光度计测定样品总DNA浓度的测定……………………………2 2.3.5样品总DNA完整性检测……………………………………………………2 3结果与分析……………………………………………………………………………3 3.1抽提样品DNA浓度和纯度……………………………………………………3 3.2柑橘总DNA的检测结果…………………………………………………………3 3.3 PCR检测结果…………………………………………………… ………………3 4结论与讨论……………………………………………………………………………4 参考文献…………………………………………………………………………………5 致谢………………………………………………………………………………………6  文献综述 [摘 要]：本文综述了柑桔黄龙病的分布、发生情况、病原菌的分类、流行条件、检测与诊断、以及黄龙病的综合防控技术。 [关键词]：柑橘黄龙病；木虱；研究进展 1前 言 柑橘黄龙病(citrus Huanglon ing，HLB)是由柑橘黄龙病相关病原菌引起的毁灭性病害。该病在不同国家(地区)曾有不同的名称，在中国大陆称为黄龙病，在我国台湾称为立枯病(1ikubin)，在菲律宾称为叶斑驳病(1eaf mottle)，在印度称为梢枯病(dieback)，在南非称为青果病(greening)，在印度尼西亚称为叶脉韧皮部退化病(vein phloemdegeneration)。由于黄龙病的嫁接传染性最先由林孔湘教授确认，1995年在中国福建省福州市召开的第l3届国际柑橘病毒学家组织(IOCV)会议商定以黄龙病作为该病害的统一名称[1]。由于尚未找到好的防治药剂， 染病后只有挖除，所以俗称柑橘上的癌症。柑橘黄龙病的出现和蔓延，引起各柑橘种植国家的广泛关注。为了深入开展相关研究，更好地开展防治工作，本文对该病的发生与分布情况、病原菌分类、流行条件、检测与诊断、及防治技术等的研究成果进行了概述。 2 黄龙病的分布、发生情况 到目前为止，黄龙病主要分布于亚洲、非洲和美洲的4O多个国家和地区[2-3]；其中，巴西、美国、古巴和伊朗近几年才报道发生，伊朗2008年才首次报道。90年代末,美国对柑橘黄龙病普查中发现了该病的传病媒介柑橘木虱,但未发现柑橘黄龙病。2005年9月,在美国佛罗里达州南部发现黄龙病,严重威胁着佛罗里达州达90万hm2早的柑橘生产[4]。 我国柑橘黄龙病最早发生在广东省汕头地区,长期以来,该病在广东、广西、福建、台湾发生严重。1983一1984全国组织的柑橘黄龙病普查中,发现浙江、云南、四川、江西、湖南等省有柑橘黄龙病和柑橘木虱发生,但均属零星分布[5]。近年来,由于全球气温持续变暖,柑橘木虱活动范围扩大,柑橘种质资源的频繁调运,柑橘黄龙病的发生在我国有逐渐扩大的趋势。1996～2000年,贵州省28个县(市)进行了柑橘黄龙病调查和鉴定,结果表明发生柑橘黄龙病的县(市)有12个,较80年代新增3个,柑橘