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Snail在上皮细胞间质转化中的作用及对ZEB1调控的研究的中期报告 中期报告： Introduction 上皮细胞间质转化（epithelial-to-mesenchymal transition, EMT）是一种重要的胚层发育过程，也是一种在生理和病理状态下所必需的生物学现象。EMT是指上皮细胞下降其细胞间的连接，脱离其邻近上皮细胞，失去极性，并获得间充质细胞特征的过程。在癌症转移中，一些癌细胞通过EMT将其初始上皮特性改变为间充质状态，有助于它们从原位生长转移和侵入周围组织和器官。 Snail是EMT的一个重要调节因子，是一种锌指转录因子，能够抑制E-cadherin表达及其他上皮细胞标记物的表达，同时促进间充质细胞的标记物表达。Snail能够在细胞中发挥多种生理和病理生物学效应。 ZEB1是Snail在癌转移中的一个重要调节因子，能够通过抑制E-cadherin表达和增强间充质特征的表达，来促进癌细胞转移和侵入。然而，目前对于Snail和ZEB1在癌症转移中的关系，以及它们在EMT中的作用机制还不十分清楚。 Materials and methods 1. Cell lines and transfection 我们选择了人乳腺癌MDA-MB-231细胞系作为研究模型，利用shRNA技术构建了稳定的Snail和ZEB1敲减细胞系。同时还构建了对应的空白（negative control，NC）和细胞转染介质（lipofectamine2000）对照组。采用Western blot分析了Snail和ZEB1表达的敲减效果。 2. Wound healing assay 通过伤口愈合实验来测试各组细胞在EMT中的迁移能力。结果显示，敲减Snail或ZEB1的细胞在伤口愈合程度上均表现出较NC组减弱的愈合能力。 3. Transwell invasion assay 采用Transwell实验进一步检测各组细胞的迁移和侵入能力。敲减Snail或ZEB1的细胞与NC组相比，其侵入数目和侵入能力均有明显下降。 4. Western blot analysis 采用Western blot对各组细胞中EMT标记物的表达进行分析。结果表明，敲减Snail或ZEB1的MDA-MB-231细胞中E-cadherin的表达显著增加，而肝素和简体肌球蛋白的表达显著下降。 Results 通过上述实验，我们成功构建了敲减Snail或ZEB1的MDA-MB-231细胞系，我们发现它们在EMT过程中表现出了较弱的迁移和侵入能力。同时，研究发现敲减Snail或ZEB1的MDA-MB-231细胞中E-cadherin的表达显著增加，而肝素和简体肌球蛋白的表达显著下降。 Discussion 在这项研究中，我们证明了Snail和ZEB1在癌转移中的作用，并说明了它们在EMT中的作用机制。这些数据表明，Snail和ZEB1通过调控细胞表面上的E-cadherin等分子的表达，来促进癌细胞的转移和侵入。这些发现表明，Snail和ZEB1可能是癌症转移中的重要调节因子，为寻找治疗癌症转移的新靶点提供了有用的线索。