PACE MDQ使用注意事项及保养.ppt

P/ACE MDQ 使用注意事项及保养 张 鹏 Beckman Coulter Inc. 毛细管及卡盒部件 毛细管切割时用力不能过大，不可压断毛细管；仅需切割一次，不可来回切割 未涂层毛细管的窗口可使用火烧、强酸腐蚀、刀刮等方式制作，窗口的大小以3mm左右为最佳，最好不要超过5mm，窗口过大时易导致毛细管的折断 涂层毛细管的窗口只可采用强酸腐蚀、刀刮的方式制作，切勿用火 毛细管及卡盒部件 毛细管安装和拆卸时都有固定的方向，不能装错方向。 毛细管及卡盒部件 毛细管的长度调节通过调节冷却软管长度来实现，更换新冷却软管的时候一定要注意两端的O形垫圈不要漏垫，深蓝色的Ferrule安装方向要注意，如图所示。浅蓝色的Tubing Nut不可旋得过紧 毛细管及卡盒部件 检测窗口的安装应该是在将毛细管两端卡好并切割完毕以后；PDA检测器只可使用标识为8的窗口，UV检测器8和2的标识窗口都可以使用。 毛细管及卡盒部件 UV及DAD检测窗口由卡盒的背面向正面插入，且不可插错方向。检测窗口安装之前一定要确保其内没有保留有未取出的黑色O形垫圈 毛细管及卡盒部件 将DAD检测窗口安装后一定要将O形垫圈装入 毛细管及卡盒部件 毛细管的冲洗和保存注意区分涂层管与非涂层管。新的非涂层管的冲洗过程通常为：甲醇(5min) →水(5min) → 0.1NaOH(15-30min) →水(5min) →缓冲液(5-15min) 新涂层毛细管的冲洗步骤为：0.1N Cl(2min) →水(2min) →缓冲液(2min)，绝对不能用碱冲洗毛细管，也不可采用pH超过8的缓冲液 样品瓶及托盘 三种标准配置的缓冲溶液及样品瓶各有其相对应颜色的瓶盖，不可混用 使用的缓冲溶液应过滤，样品应过滤或离心 2mL缓冲溶液瓶的液面高度不得低于1/2，也不可超过瓶颈，标准的液面高度如下图示： 样品瓶及托盘 2mL缓冲溶液瓶瓶口和瓶颈内部不得沾有液体，如果有液体存在，要将瓶口和瓶颈内壁的液体擦干再盖瓶盖。否则瓶盖易滑出，从而导致毛细管及电极的折断。瓶盖上的液体残留可能会导致漏电现象发生 当发现缓冲溶液瓶盖上有液体时一定要立即擦干或更换 缓冲溶液瓶盖及样品瓶盖均不可用洗涤剂长时间浸泡或放入烘箱烘干，会导致瓶盖的老化 用于装废液的样品瓶要及时清理，不可过满，过高的废液量既会污染毛细管，也会造成气路的阻塞 样品瓶及托盘 仪器运行期间不得打开Sample Cover，只有托盘在Load状态才可以打开Sample Cover和Cartridge Cover。在直接控制面板和程序冲洗过程中可打开Sample Cover，可利用检查毛细管工作状态。 如在仪器运转中，出现样品瓶或其它异物调入舱中，应立即关机，将异物找出 样品瓶帽如使用时间过长或被试剂腐蚀后，可能会出现瓶帽失去弹性而变硬，此种瓶帽不要使用 涂层毛细管及试剂盒的使用 涂层毛细管不得使用氢氧化钠溶液冲洗 涂层毛细管不可用火焰烧制窗口 涂层毛细管使用结束后应用纯水冲洗干净，然后从仪器上拆下，连带卡盒放入卡盒盒中，两端浸泡在事先装满水的2ml缓冲溶液瓶中。最后整个盒子放入4℃冰箱保存 在使用任何试剂盒之前必须仔细阅读试剂盒的使用手册，不清楚的地方要与工程师联系以免操作失误造成损失 在使用试剂盒进行用户方样品分析之前，请用试剂盒中的标准试剂测试毛细管等部件，确保能得到与参考谱图类似的结果 由于涂层管消除了电渗流和物质在毛细管内壁的吸附，通常来说重复性是非常令人满意的，如果涂层管出现重复性不佳的情况，则很有可能是涂层的损坏 未涂层毛细管的使用及提高重复性 新毛细管应严格按照前处理步骤进行清洁处理 在相同实验条件下每个样品之间的冲洗步骤应只以buffer冲洗为佳，避免NaOH、水等物质的冲洗 Buffer冲洗的时间一般为3-5min，如果重复性不佳，可提高冲洗压力或延长时间来尝试提高实验的重复性 若以上步骤还是难以达到理想的实验重复性且出现每次出峰时间的后移情况，则是因为样品中物质在毛细管内壁的吸附所引起，此时则需要使用0.1NaOH的冲洗，冲洗时间以0.5-2min，以去除毛细管内壁上的吸附物，此后再用水和Buffer较长时间冲洗，以确保buffer与毛细管内壁之间的平衡稳定形成 未涂层毛细管的使用及提高重复性 对于使用SDS或CTAB等表面活性剂的实验，需要注意这些表面活性剂与毛细管表面之间的平衡对实验重复性是至关重要的。所以此类实验一般不采用NaOH冲洗毛细管，而是采用buffer的长时间冲洗和预电泳来提高实验的重复性。当实验进行到一定次数以后再用NaOH来清洁毛细管，并用buffer长时间冲洗获得平衡 实验结束以后要用buffer长时间冲洗毛细管，然后将毛细管两端用buffer封上，来防止毛细管内溶液蒸发干 未涂层毛细管的使用及提高重复