艾滋病实验室检测管理与设备维护.ppt

艾滋病实验室检测管理与设备维护 HIV抗体检测的目的 监测:以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。 诊断:以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。 血液筛查: 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 HIV抗体检测的要点 筛查试验阳性不能出阳性报告。 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。 严格按照试剂盒说明书操作。 注意防止样品间交叉污染。 一、HIV抗体诊断 临床上实际应用的是测定特异性HIV抗体，包括初筛和确认两个方面。HIV抗体一般在感染后几周逐渐出现，可延续至终身，是重要诊断依据，但是从感染到血清抗体阳转有一段窗口期，平均为1到3个月，还有一小部分比例的HIV感染者出现迟缓反应，95%以上HIV-1感染者产生抗体的时间是在感染后6个月以内。 常用样品 主要为血液 此外还可用唾液检测HIV（Orasure，如Salivacard），尿液检测HIV抗体 。 常用方法 双抗原夹心ELISA试验原理 双抗原夹心ELISA试验原理 明胶颗粒凝集试验(PA)原理 雅培Determine（硒标） 快速试剂试验原理 金标快速试剂试验原理 窗口期和残余危险度 二、艾滋病病毒的抵抗力 HIV抵抗力 HIV一旦离开宿主在外界环境中生存能力便很快消失，HIV对环境中的物理因素和化学因素抵抗力均较弱，比乙肝病毒（HBV）的抵抗力低得多。因此，对HBV有效的消毒和灭活方法均适用于HIV。 HIV抵抗力--物理因素 HIV对热很敏感，对低温的耐受性强于高温。因此，可以用高温灭活HIV，在低温条件下保存HIV。 对紫外线不敏感：用紫外线、γ射线不能灭活HIV。 HIV抵抗力--物理因素 HIV灭活：美国疾病控制中心证明，在干燥环境中的HIV 浓度在几小时之内降低90～99% （即降低1～2 log ）。在室温（22～27℃）液体环境下HIV可存活15天以上；经56℃处理30分钟，可使HIV在体外对人T淋巴细胞失去感染性，但不能完全灭活血清中的HIV；血清中HIV经过60℃3小时或80℃30分钟作用后不能检出感染性HIV。目前，世界卫生组织推荐的逆转录病毒灭活方法是100℃20分钟。 HIV抵抗力--物理因素 HIV保存： 在-70℃不加保存剂冷冻保存，其感染性可丧失。但若在-70℃保存于35%山梨醇或50%小牛血清（FBS）可存活3 个月以上，在液氮中（-196℃）HIV可存活数年以上。因此，毒种必须置于液氮中方可长期保存。 HIV抵抗力—化学因素 HIV耐碱不耐酸：在pH3.0条件下HIV滴度在10分钟可下降4个对数级，而pH值高达9.0时，HIV滴度下降甚微。 对含氯消毒剂敏感。0.5％次氯酸、2％戊二醛溶液、3％碘酒、6％过氧化氢可在3～5分钟内灭活HIV。 实验常用的消毒办法 三、HIV实验室检测管理 艾滋病检测工作规范要点 实验室设置 国家艾滋病抗体检测参比中心 艾滋病抗体确证实验室--卫生部批准 艾滋病抗体初筛中心实验室--卫生厅审批 艾滋病抗体初筛实验室--卫生厅审批 各级实验室承担相应的任务 确证实验室职责 对初筛实验室人员技术培训 对初筛实验室考评或验收 对初筛实验室进行年度质控血清考核 评估省内所使用的HIV抗体检测试剂 省内各级初筛实验室的质控管理 艾滋病抗体初筛实验阳性标本的确证 向上级部门报告检测工作 艾滋病抗体初筛中心实验室职责 本地区初筛实验室的技术指导和管理 本地区初筛实验室人员的技术培训和咨询 本地区初筛实验室的质量管理和质量控制 对初筛实验可疑阳性或阳性标本的复检 承担艾滋病抗体的初筛实验和咨询 汇总本地区艾滋病检测结果并上报 初筛实验室的职责 艾滋病抗体初筛实验和检测前后的咨询 及时向中心实验室送检初筛实验阳性或可疑阳性标本以及需做确证实验的标本 作好本实验室的各项管理，如标本登记、实验记录、安全记录等。 按规定向上级报告实验室工作和检测的阶段总结 初筛实验室的基本条件 房屋--清洁区、半污染区、污染区，控温 设备--酶标仪、洗扳机、冷藏，微机，高压灭菌器、生物安全柜、洗眼器等 人员--3名以上技术人员，含1名中级以上 技术职称。全部须经专业技术培训 质量保障措施 安全保护措施--环境、个人 具备各项规章制度 HIV抗体检测实验室结构示意1 HIV抗体检测实验室结构示意2 HIV抗体检测实验室结构示意3 人员防护的基本装备 隔离衣（一次性） 帽子 口罩 眼镜（依据个人视力配置，不准移出实验室 能保护脚面的、便