雌核发育银鲫微卫星杂合位点在传代中的分离情况分析.pdf

中文摘要 本实验用黑龙江水产研究所生物技术室首批合成筛选出的14对银鲫微卫星引物对方 正银鲫的生殖机制及进化机制进行探讨。 用流式细胞仪(FCM)测定黑龙江方正县双龙水库的银鲫的倍性，从已确定为三倍体行 雌核发育的银鲫中检测具有杂合位点的个体，并用同源亲鱼繁育子代，分析杂合位点在子 代中的分离情况。用2％琼脂糖凝胶电泳和8％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分别对所筛选的 两组父母本及其繁育的子代进行检测分析。除个别样本外，筛选出的14对微卫星引物在 88尾子代个体及4尾亲本中均能重复稳定地扩增出相应的同源序列，随引物不同，各等位 基因数在琼脂糖凝胶电泳图谱上，为1—3个，大小在141-301 bp之间；在聚丙烯酰胺凝 胶电泳图谱上，则表现出更多的多态性，等位基因数为l～12个，大小在116-459 bp。通 过对微卫星等位基因和基因型分析发现，两组子代的基因型基本与母本的基因型是一致 的，从而从分子水平证明银鲫行雌核发育的特性。但在第一组的22尾个体中检测到一尾 特异个体，此个体在所检测的14个微卫星位点均出现母本部分特异条带的缺失、弱化； 并表现出部分父本的特异条带和自身的特异条带。统计结果显示：第一组母本银鲫与子代 代的遗传相似性为0．3404，高于母本与父本的遗传相似性。这～结果似乎从分子角度证明 了雌核发育银鲫卵子对于同源精子入卵的不同反应，可能少数卵子在配子形成过程中发生 了部分减数分裂，同源精予在卵质中可能膨大、解凝，并进一步发育成雄性原核，与雌性 原核发生部分融合。至于此尾特异个体是否表现为雄性以及特异分子标记在其后代中是否 可以遗传，还需进一步研究证明。 此外，本实验还用筛选出的14个银鲫微卫星标记对黑龙江方正县双龙水库的三倍体 银鲫与二倍体普通鲫的遗传多态性进行了比较研究，用2％的琼脂糖凝胶进行检测，大多数 微卫星位点在个体间表现出丰富的多态性，个体等位基因数在1~4个，两个群体在多数微 卫星位点表现出相同或相似的等位基因和基因型。统计分析结果显示：二倍体鲫鱼的遗传 杂合度耍高于三倍体银鲫，两者间的遗传相似系数达0．6以上，三倍体银鲫与同水体二倍 体鲫的遗传距离较近，根据前人的实验结果，结合本实验的研究结果，认为银鲫是由普通 鲫种内加倍化而来的，并通过自身两种生殖方式的存在，保持并延续了较高的多态性和杂 合度，从而适应环境的变化和发展。 关键词：三倍体银鲫；雌核发育；微卫星标记；杂合位点；分离；遗传多态性 —— 竺鉴茎蔓垦竺燮兰呈壁垒垒皇壅堡垡!垫坌壅堕燮窒 Abstract Asauniquetriploid silvererucian amphiproticgynogenesis carp silver crucian auratus as consideredthemodelfishtotheresearch carp(Carassius of gibelio)is the of modeandthesex evolutionary genetics，theregulation reproduction determining mechanisminunisexual and vertebrate．In of mulfiploid 2003，the