斑马鱼的前产卵准备.ppt

前言 斑馬魚為研究脊椎動物胚胎發育的理想模式生物。【補充：斑馬魚胚胎發育影片觀賞(1)(2)(3)】 優點: 子代數多 可以光週期誘發產卵 體外受精，胚體透明，胚胎發育快 可以誘發產生突變種 可以分子生物技術控制特定基因表現或產生基因轉殖魚 在胚胎發育時期的訊號傳遞路徑和哺乳動物有很高的同源性 活動目的 為順利獲得斑馬魚受精卵，需調控其光週期並布置產卵環境。 本活動目的主要為產卵準備，以獲得實驗所需之魚卵。 分辨斑馬魚雌雄 公魚：與性成熟前體態相似，保持原本的 流線型，臀鰭較母魚長。在身上各 個魚鰭末端，時常可看到有明顯的 黃色出現。 分辨斑馬魚雌雄 母魚：性成熟後肚子開始膨大，裡面卵囊 形成卵，臀鰭較公魚來得小、短且 較圓，魚鰭末端有時也有黃色出 現，但相對於公魚出現的時間比較 少。 步驟一、布置環境 ※光週期調控：斑馬魚需要在約14:10光照週 期下，才會產生交配產卵的 行為。 ※水溫：需在24~28.5℃。 在適當的水溫下，將公魚和母魚分缸進行飼養約5-7天後，即可在光週期天亮後1小時內，看到斑馬魚進行交配行為。 步驟二、交配前準備 產卵前一天的準備： 挑選出適當的公魚跟母魚，體長要盡量一樣，母魚可以略大一些。 將公魚與母魚分別放置產卵缸的兩側，中間設置隔板將其隔開。 產卵房的準備 產卵房的準備 避免剛產出的魚卵被成魚吃掉，而有的特殊設計！ 步驟三、交配當天 光週期控制的隔天清晨，當天亮後約十分鐘，公魚和母魚會恢復清醒。 當母魚發現公魚時，由於前一天的費洛蒙影響，母魚在天亮後也釋放另一種費洛蒙，使公魚往母魚方向前去的行為更加明顯及強烈。 此時就可以準備打開隔板，讓公魚跟母魚進行交配。 交配中 公魚在交配的過程中，採絕對主動方式，會先以眼睛觀察並決定要向哪一隻母魚進行攻勢。其次會進行求偶舞蹈，在想要交配的母魚周圍繞圈圈或是８字型，游向母魚後，利用腹部側面摩擦母魚，刺激母魚排卵，公魚便會同時射精。 產卵 母魚會一次把全部腹中的卵包括卵囊全部排出，一胎約會生出200-500顆卵。排出後母魚會重新產生新的卵，約3-5天就可以再生下一次卵。 伴隨著卵的釋放，會有其他激素一起排出，這種激素可以讓母魚順利把卵排放出來，另外一個功能則是讓其他還產生卵的母魚，停止排卵的行為，這在演化上算是一種競爭的結果。 注意事項（1） 母魚體內的卵，如果太長時間沒有交配，或是沒有完全排完，卵會留在體內，並不會重新被吸收回去，如果超過太久沒有排卵，母魚腹部中的卵會死亡，並且造成母魚腹部類似囊腫的殘留物，這種囊腫會讓母魚下次排卵不順，甚至無法排卵而被公魚激烈的追求之後而難產死亡，目前也沒有較好的方式改善這種情況。一般認為，固定一段時間就讓公魚跟母魚進行交配，讓母魚把卵排出，是較好的方式。 注意事項（2） 斑馬魚的卵在受精後，約72小時即可孵化，在這段期間內，不需要給予打氣，只要放在乾淨的水中即可孵化。放在解剖顯微鏡下，即可清楚的看到斑馬魚胚胎發育的整個經過。 * 斑馬魚的產卵準備 返回 一顆細胞至受精後四小時 時期 返回 四小時至十五小時 時期 返回 十五小時至三十小時 時期 觀賞影片 返回 觀賞影片 返回 觀賞影片 放入隔板及斑馬魚 上盒與普通下盒組裝 上盒底以網狀材料代替 1 2 3 4 完成! 返回 公魚會試圖往母魚處過去 母魚則是不會特別想往公魚的方向靠近 公魚看到母魚後，會釋放一種費洛蒙 使得母魚會先做好了隔天清晨要產卵的準備 返回 觀賞影片 返回 觀賞影片 返回 魚卵會落於下盒的水中 *