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细胞凋亡检测全攻略

一、概述

细胞凋亡是一种细胞主动有序的死亡，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用，它并不是病理条件下自体损伤的一种现象，而是为了更好地适应

生存环境而主动争取的一种死亡。今天，小爱向大家介绍细胞凋亡六大常用方法：细胞膜磷脂酰丝氨酸检测、TUNEL缺口末端标记法、线粒体膜电位检测、

Caspase凋亡核心分子检测、形态学观察、线粒体膜电位转换孔检测。

细胞凋亡检测方法大全

二、检测方法

1、细胞膜磷脂酰丝氨酸检测

基于细胞代谢物进行的检测方法有AnnexinV-FITC/PI检测法（abs50001）、AnnexinV-EGFP/PI检测法（abs50006）、AnnexinV-APC/PI检测法

（abs50009）、AnnexinV-PE/7-AAD检测法（abs50007）、AnnexinV-APC/7-AAD检测法（abs50008）。今天，小爱给大家着重讲一下AnnexinV-FITC/PI

检测法。

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（1）检测原理

AnnexinV/PI检测原理

（2）适用样本：贴壁细胞、悬浮细胞

（3）设备：流式细胞仪/荧光显微镜

（4）优势：Annexin是目前最敏感的指标之一；定性、定量

（5）AnnexinV细胞凋亡检测结果

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在荧光显微镜下，以AnnexinV-FITC＆PI双染可以鉴别正常细胞、早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞。如上图所示，a、b、c为荧光显微镜下的凋亡细胞，其中

a、b分别为AnnexinV-FITC和PI单染，c为AnnexinV-FITC＆PI双染；d为普通光学显微镜下的凋亡细胞（红色箭头所指为晚期凋亡细胞，绿色箭头所指

为早期凋亡细胞）。

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AnnexinV细胞凋亡流式检测结果

客户使用AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(abs50001)的效果如上图，文献名称：Serinemetabolismantagonizesantiviralinnateimmunityby

preventingATP6V0d2-mediatedYAPlysosomaldegradation期刊：CellMetabolism影响因子：27.287

（6）AnnexinV细胞凋亡检测注意事项

A、建议不用含EDTA的胰酶消化贴壁细胞。

B、建议在用胰蛋白酶处理前单独收集培养液中悬浮的细胞，保存在2%的BSA中。

C、试剂使用前低速离心，以免液体积存管盖和管壁；

D、AnnexinV-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞

标记后，在暗室内用显微镜观察；

E、整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。

F、在细胞洗涤的最后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。