细菌类生物农药.ppt

RAPD(randomamplifiedpolymorphicDNA)由Williams等于1990年创立。其基本原理与PCR技术一致。PCR(Polymerase?chain?reaction?)技术是一种体外快速扩增特异基因或DNA序列的方法，由Mullis等于1985年首创。补充2：第31页，共51页，星期日，2025年，2月5日苏云金杆菌其他杀虫蛋白迄今,苏云金芽胞杆菌已发现有十几种生物活性成分，如辅助蛋白可以有利于提高晶体蛋白的杀虫活性。如双效菌素(zwitternicinA)除具有增效苏云金芽胞杆菌的杀虫活性外,还具有抑制疫霉和腐霉的生长作用,可用于防治植物病原菌病害的目的存在于苏云金芽胞杆菌细胞内的自身诱导物抑制蛋白(autoinducerinhibitor）可以抑制植物病原菌细胞间信息传递的关键分子，达到降低病原菌毒素基因表达的水平,避免植物致病的产生几丁质酶第32页，共51页，星期日，2025年，2月5日VIP蛋白（(vegetativeinsecticidialprotein）营养期杀虫蛋白已被视为苏云金芽胞杆菌的第二代杀虫蛋白.但目前对营养期杀虫蛋白的了解还远不及杀虫晶体蛋白。蛋白的杀虫活性高Vip3A对小地老虎毒杀力比cry1A高260倍，对具有（杀虫晶体蛋白）抗性的昆虫有很好的疗效。第33页，共51页，星期日，2025年，2月5日杀虫基因的应用1多基因－复合杀虫蛋白基因工程菌的构建2转基因植物的构建第34页，共51页，星期日，2025年，2月5日苏云金杆菌发酵工艺1.发酵工艺一般流程原料→灭菌→微生物培养→浓缩→晶体蛋白的分离→活性测定菌种2.发酵培养基：豆饼粉2.5,淀粉2.0,酵母粉2.0,玉米浆2.0,添加剂Ⅰ号0.1,葡萄糖1.0,KH2PO40.3,CaCO30.1,CaCl20.05,MgCl20.01,CuCl20.005,ZnSO40.002,CoCO30.005第35页，共51页，星期日，2025年，2月5日3.培养条件温度：28-30，通气量：1:0.5~11第36页，共51页，星期日，2025年，2月5日关于细菌类生物农药第1页，共51页，星期日，2025年，2月5日一、细菌与昆虫的细菌性病害细菌属原核生物界细菌门原核生物的特点：1.拟核由双链DNA构成，也是基因载体，染色体没有结合蛋白。2.没有复杂折叠、分割成不同原生质单元的膜系统3.70S的核蛋白体分布于细胞之中，第2页，共51页，星期日，2025年，2月5日原核与真核细胞的区别第3页，共51页，星期日，2025年，2月5日附：古细菌（archaebacteria）具有原核生物的某些特征，无核膜及内膜系统；也有真核生物的特征，甲硫氨酸起始蛋白质的合成、核糖体对氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核细胞的相似、DNA具有内含子并结合组蛋白。此外，细胞膜中的脂类是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖。生活在极端环境中，如：产甲烷菌、极端嗜盐菌、嗜热嗜酸菌。第4页，共51页，星期日，2025年，2月5日二、细菌性感染昆虫后的症状特点：昆虫活动力降低、食欲减退、口腔和肛门周围有排泄物病原侵入后导致败血症；虫体死亡后，颜色加深，迅速变为褐色或黑色，部分虫体软化腐烂。死后虫体一般都有臭味第5页，共51页，星期日，2025年，2月5日2、细菌类生物农药的类群目前报道的细菌有100种，主要分布在芽孢杆菌科（Bacillaceae）芽孢杆菌属（Bacillus）、梭状芽孢杆菌属（Clostidium）；肠杆菌科（Enterobacteriaceae）沙雷氏菌属（Serratia）、变形杆菌属（Proteus）、肠杆菌属（Enterobacter），弧菌科（Vibrionaceae）气单胞菌属（Areomonas）；假单胞菌科（Pseudomonadaceae）假单胞菌属（Pseudomonas）第6页，共51页，星期日，2025年，2月5日链球菌科（Streptococcaceae）链球菌属（Streptococus）微球菌属（Micrococus）立克次氏体（Rickettisaceae）沃尔巴立克次氏体属（Woerbachia）立克次氏小体属（Rickettisella）枝（支）原体目（Mycoplasmatales）螺属支原体（Spiroplasma）第7页，共51页，星期日，2025年，2月5日3杀虫细菌报道的