流式细胞仪在不孕诊断中运用学习.ppt

精子DNA碎片率检测方法介绍 （SDFA） 及流式细胞仪在不孕诊断中运用 ICSI (intracytoplasmic sperm injection) 卵母细胞单精子显微注射技术 2. IUI ( intrauterine insemination) 3. IVF 4. ART 主要内容 1.SDFA（精子DNA碎片率检测） 进一步的精液检查 2.免疫性不孕/流产病因学诊断 自然杀伤细胞的检测 3.自然杀伤细胞检测相关试剂 SDFA检测方法背景 -自从生殖领域不孕诊疗的不断发展，精液检查一直是 我们所关注的，但其评价的标准的确定，还尚未达成一致 -许多检测声称是更优越的，并能给临床医生提供更多信息 -我们仍然需要有统一的评价标准 精子DNA碎片检测: 1980开始?当初声称能预测IUI, IVF, 及 ICSI的成功率 之后，碎片率的检测一直未标准化 新的数据证明： 碎片率的检测能提供 IUI 还是 IVF/ICSI助孕方式选择的参考意见 不孕患者初诊筛查流程 ART初诊患者 IUI患者 不孕 患者 精液常规分析 已做碎片分析 未做碎片分析 80-90%第一次IUI败 70-80%总是失败 无精子碎片率检查 进行精子碎片分析 IUI失败后 放弃ART 更高的IUI成功率 大部分人在失败 后不会尝试ART 更多婴儿 出生 IUI失败的病人 将行IVF/ICSI 首次ART患者 什么是SDFA？ SDFA通过评估精子的健康状况， 帮助不孕患者选择更适合的助孕方式 SDFA能评估精子的DNA损伤程度， 而此异常有可能引起IUI助孕的失败 DNA碎片指数---DFI 精子经酸处理及染色后 1.DNA完整的细胞染色--绿色 2.DNA受损的细胞染色--红色 DNA碎片指数---DFI 基于荧光强度的差异 可用流式细胞仪分析检测 DNA碎片指数---DFI 计算受损DNA细胞所占的比值 即患者精液标本的DNA碎片率指数 ---DFI SDFA检测文献支持-1 大样本多中心临床研究结果证实 SDFA检测结果DFI指数： 1.能指导辅助生殖助孕方式选择 2.能预测辅助生殖助孕的成功率 SDFA检测文献支持-2 已发表的文献中 SDFA检测结果---DFI指数 在不同人群中的异常发生率 自然杀伤细胞（NK）的检测 1.自然杀伤细胞是淋巴细胞的一种 其细胞表面表达CD56+等 2.在不孕或反复自然流产患者，其外周血或子宫内膜上NK细胞活性增加 3.使用抗体荧光染色技术，通过 流式细胞仪可检测NK细胞 NK细胞检测相关抗体 编号 品名 克隆 亚型 规格 349041 Mouse IgG1-FITC X40 Mouse IgG1, k 100ug 349043 Mouse IgG1-PE X40 Mouse IgG1, k 100ug 347202 Mouse IgG1-PerCP-Cy5.5 X40 Mouse IgG1, k 50ug 340442 Mouse IgG1-APC ii ii 100ug 349044 Mouse IgG-PerCP ii ii 100ug 347747 CD56-PE MY31 Mouse IgG1, k 100tests 347617 CD16-PE B73.1 Mouse IgG1, k 100tests 349201/340542 CD3-FITC SK7 Mouse IgG1, k 50/250tests 347463 CD45-FITC 2D1 Mouse IgG1, k 100tests 347493/347497/333945 CD14-FITC/CD14-PE/CD14-APC-Cy7 MOP9 Mouse IgG1, k 100tests 340436 CD14-APC ii ii 25ug 340585 CD14-PerCP ii ii 25ug 340911/340912/340913 BD Multi-Check Control 　 　 * * * * * *