人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和表达的开题报告.docx

人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和表达的开题报告

开题报告

题目：人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和表达

一、研究背景

心血管疾病是目前世界上最主要的致死原因之一，其中冠心病是一种常见的心血管疾病，是由于心脏冠状动脉供血不足导致心脏缺血而引起的一系列病变。CITED2是一种蛋白质转录因子，已被证实在胚胎发育和心肌细胞分化中发挥重要作用，并被认为是心脏疾病的潜在治疗靶点。此外，已经报道了CITED2的两种突变型与心脏发育缺陷之间的关联。

二、研究目的

本研究旨在构建并表达人CITED2野生型和两种突变型真核表达质粒，以探究它们在心肌细胞分化和心脏发育中所起的作用，并为心脏疾病的临床研究提供理论基础。

三、研究内容

1.从人体细胞中提取RNA并逆转录成cDNA，扩增人CITED2野生型和两种突变型基因序列。

2.将CITED2野生型和两种突变型基因序列克隆到真核表达质粒pCMV-Tag2B中，构建CITED2野生型和两种突变型真核表达质粒。

3.验证构建的真核表达质粒是否准确，并通过Westernblotting等方法检测CITED2野生型和突变型的表达情况。

4.进行心肌细胞分化实验和心脏发育相关的实验，观察不同类型CITED2对心脏发育和心肌细胞分化的影响。

四、研究意义

本研究将建立一种诱导心肌细胞分化的体系，对人CITED2在心脏发育和心肌细胞分化中的作用进行深入研究，并探索CITED2突变与心脏发育缺陷的关联。同时，本研究的结果将为心脏疾病的临床治疗提供新的理论基础和潜在治疗策略。