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水产论文4500字:娃娃鱼.doc

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  水产论文4500字:娃娃鱼 古典文学中常见论文这个词,当代,论文常用来指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章,简称为论文。以下就是由编为您提供的水产论文4500字。 病毒培养及滴度测定 在多个T-25细胞培养瓶中接种EPC细胞,培养至汇合单层,弃去培养液,用无菌的Hanks液洗涤细胞1次,取细胞培养的GSIV病毒液,以感染复数(MultiplicityofInfection,MOI)为0.5的量接种病毒液于细胞培养瓶中,所接种的病毒液体积为1mL/瓶,加入适量的助感染剂Polybrene(终浓度10mu;g/mL),置于25℃培养箱中吸附1h,期间每20min轻轻往复倾斜培养瓶数次,以利于病毒均匀吸附。吸附完毕后吸弃病毒液,每瓶加入5mL细胞维持液(含2%(V/V)血清的MEM培养基),置于25℃培养箱中培养,逐日观察细胞病变情况。当细胞单层出现70%~80%细胞病变效应(Cytopathiceffect,CPE)时收获细胞培养物,-80℃室温条件下冻融2次,于4℃条件下4000r/min离心20min,收集病毒液上清,进行病毒滴度(TCID50/0.1mL)的测定,然后分装于冻存管中-80℃保存备用。病毒滴度测定在96孔微量培养板中进行,病毒液用不含血清的MEM培养基10倍梯度稀释,分别接种于已长满EPC细胞的96孔微量培养板中,每个稀释度设8个复孔,每孔100mu;L,对照组设8孔,每孔加入100mu;L不含血清的MEM培养基模拟感染。吸附完毕后弃去病毒液,微量培养板中所有细胞孔添加100mu;L细胞维持液(含2%(V/V)血清的MEM培养基),于25℃的条件下培养,逐日观察记录结果,按Reed-Muench法计算病毒滴度(TCID50/0.1mL)[8]。 病毒理化特性测定 1热处理试验 取1.2中制备的细胞培养病毒液3管,实验组分别置于56℃、65℃水浴中保温处理30min,对照置于20℃保温处理30min,然后分别作TCID50测定,设重复(2次)测定试验。 2酸碱敏感性试验 取1.2中制备的细胞培养病毒液3管,实验组分别用HCl(1mol/L)和NaOH(1mol/L)调整其pH值为3.0和10.0,于20℃处理60min后,调节pH值至7.0。对照用不含血清的MEM培养基作相同的处理,然后分别作TCID50测定,设重复(2次)测定试验。 3有机溶剂敏感性试验 能力与知识的关系,相信大家都很清楚。知识不是能力,但却是获得能力的前提与基础。而要将知识转化为能力,需要个体的社会实践。下面是编辑老师为大家准备的5000字水产论文。 细胞免疫 对虾血淋巴细胞分为透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞,主要具有吞噬、包囊和胞吐功能,能够合成和释放多种免疫活性因子参与体液免疫[16]。研究发现,30℃高温组的罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)血淋巴细胞的吞噬和清除能力显著高于20℃常温组,说明高温具有促进对虾血淋巴细胞免疫力的作用[17]。而且高温感染组对虾的血淋巴细胞总数显著高于常温感染组[10],表明在高温下感染对虾白斑综合征病毒能诱导宿主细胞非特异性免疫力升高。 体液免疫 对虾等甲壳类动物体内没有类似T淋巴细胞和免疫球蛋白等特异性抗体,酚氧化酶激活系统在对虾非特异性免疫中起着关键作用。酚氧化酶是合成黑色素的关键酶,能诱导多种血淋巴细胞的体液防御反应[18]。在高温下用美人鱼发光杆菌(Photobacteriumdamsel)感染对虾,其酚氧化酶、超氧化物歧化酶、呼吸爆发活性均显著高于常温感染组[19]。高温下感染对虾白斑综合征病毒的日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicas)诱导出的酚氧化酶活性显著高于常温感染组[10]。表明高温条件下感染对虾白斑综合征病毒,对虾的非特异性免疫力高于常温感染组,能够在一定程度上抵御感染。 细胞凋亡 细胞凋亡是高度调控的细胞程序性死亡,在维持多细胞动物细胞稳态、细胞数量和组织大小等方面具有十分重要的作用。在细胞凋亡过程中,细胞内外凋亡信号依靠着一系列精确调控的半胱氨酸蛋白酶介导的酶促级联反应和能量依赖性,最后由半胱氨酸蛋白酶-3执行关键的凋亡程序[20]。在病毒感染宿主细胞的过程中,病毒会激发宿主细胞内的相关感受器,随即激发细胞内的凋亡反应。当病毒感染细胞诱发凋亡后,感染细胞会通过提前溶解,形成凋亡小体并被周围的细胞吞噬,不引起炎症反应,进而起到消灭病毒的作用,所以细胞凋亡在宿主细胞抵抗病毒感染的过程中起着重要作用[21-22]。另一方面,入侵的病毒为了复制更多的子代病毒,会分泌多种抗凋亡蛋白与凋亡通路中的关键蛋白作用,起到阻断或者延迟细胞凋亡的作用[20]。整个病毒感染过程中,宿主细胞的凋亡和病毒蛋白的抗凋亡作用相互对抗,特别是在病毒感染的初期
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