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家蚕膜蛋白BmOBP2的分离纯化及结晶条件初探的中期报告
本研究旨在分离纯化家蚕膜蛋白BmOBP2并探究其结晶条件。经过初步实验设计和实验操作,我们得到了以下初步结果。
一、家蚕膜蛋白BmOBP2的分离纯化
1. 家蚕膜蛋白BmOBP2的表达和纯化
我们采用大肠杆菌BL21(DE3)作为表达宿主,构建了含有BmOBP2基因的重组质粒,并在IPTG诱导下表达BmOBP2。通过洗涤、裂解和纯化等步骤,得到了BmOBP2的纯化产物。
2. 家蚕膜蛋白BmOBP2的鉴定
通过SDS和Western blot等方法,我们发现目标蛋白的分子量符合预期,并且经过Western blot检测,可以明确检测到BmOBP2。
二、家蚕膜蛋白BmOBP2的结晶条件
1. 家蚕膜蛋白BmOBP2的初步结晶筛选
我们采用了常见的PEG和NaCl混合法、温度梯度法和组合筛选法等多种方法,初步筛选得到了BmOBP2结晶的可能条件。
2. 家蚕膜蛋白BmOBP2的最佳结晶条件
通过进一步的试验,我们预计最佳的结晶条件包括:甘油作为结晶缓冲剂、pH 6.5的缓冲液、10%的PEG 8000溶液和20°C左右的结晶温度。
总结:我们通过初步实验探究了家蚕膜蛋白BmOBP2的分离纯化和结晶条件,并得到了初步结果,为后续的深入研究奠定了基础。
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