GB/T 17494-2009马传染性贫血病间接ELISA诊断技术.pdf

lCS11．220 B41 a亘 中华人民共和国国家标准 1 GB／T 17494--1998 代替GB／T ofindirectELISA Diagnostictechniques technique for infectiousanemiadisease equine 2009-04-23发布 宰瞀鹊紫瓣訾矬瞥星发布中国国家标准化管理委员会仪1” GB／T17494--2009 刖 罱 本标准参照世界动物卫生组织(OIE)最新公布的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》2004年版，并结 合我国现有动物卫生法规及农业部对马传贫的相关政策和措施修订，其技术内容与OIE所推荐的基本 一致。 本标准代替GB／T17494--1998(马传染性贫血病间接ELISA技术规程》。 本标准与GB／T17494—1998相比主要变化如下： ——“前言”部分作适当变动； ——删除第2章的内容； ——第4章“仪器设备”和第5章“试剂”部分改为“材料准备”，并对内容作较大的改动； ——第6章“配制溶液”部分放置在附录内； ——修订原标准中的所有语句和计量单位等错误用法。 本标准的附录A、附录B、附录C和附录D为规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC／TC181)归口。 本标准由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所负责起草。 本标准主要起草人：相文华、郭巍、赵立平、戴玉坤。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——GB／T17494--1998。 17494--2009 GB／T 马传染性贫血病间接ELISA诊断技术 1范围 本标准规定了马传染性贫血病间接ELISA诊断技术的测定原理、材料准备、操作方法和结果判 定等。 本标准适用于检测马血清中的马传贫病毒抗体。可用于生产和经营马匹者对未注射马传贫疫苗马 匹的检疫、马传贫病马的定性，也可用于对注射马传贫疫苗马匹的免疫状态进行测定。 2测定原理 用制备的马传贫病毒抗原，包被聚苯乙烯微量板孔，使免疫反应在固相载体上进行。当被检血清中 有马传贫病毒抗体存在时，则与孔壁上的抗原形成抗原一抗体复合物，再与酶标记的抗体(抗马免疫球蛋 白)反应，最后通过测定酶作用底物催化后的产物，进行马传贫病毒抗体的定性、定量测定。 3材料准备 3．1器材 3．1．1 96孔平底微量反应板。 3．1．2微量移液器。 3．1．3酶标测定仪。 3．1．4恒温箱。 3．1．5保湿盒等。 3．2试剂 3．2．1兔抗马IgG辣根过氧化物酶结合物(简称酶标抗体)为冻干品，见附录A。 3．2．2马传贫病毒抗原包被板见附录B。 3．2．3马传贫病毒标准阳性血清和标准阴性血清均为冻干品。 3．2．4磷酸盐缓冲液(O．02mol／L，pH7．2，PBS)配制方法见第C．1章。 3．2．5洗涤缓冲液(o．02mol／L，pH7．2，PBS-0．05％吐温一20)的配制方法见第C．2章。 3．2．6血清及酶标记抗体稀释液(o．02 血清)的配制方法见第C