实验一-植物细胞有丝分裂与染色体行为观察课件.ppt

遗传学实验 指导教师：刘振兰 办公电话短号：672473 E-mail：zhenlan_liu@生命科学学院 北楼607室;显微镜使用注意事项;遗传学是一门实验性的学科。它的每一步发展都是以实验作为基础的。因而实验教学是教学中非常重要的组成部分。;参考书目;请用华南农业大学实验报告纸； 实验报告的内容： 实验目的 实验原理 主要试剂及材料 实验步骤 实验结果与分析（请用铅笔绘图） 作业及思考题 当节课的实验报告下次课交上来。;植物遗传学系列 动物及医学遗传学系列 微生物遗传学系列 果蝇遗传学系列 数量与群体遗传学系列 分子遗传学系列;实验一 植物细胞有丝分裂及 染色体行为的观察;一、实验目的;二、实验原理;三、实验步骤;1.取材 本实验以洋葱为材料，在室内(25度)培养根尖。用广口瓶装满水，把洋葱放在瓶口上，使洋葱的鳞茎盘与水充分接触，每天换水促进生长，生根前去掉洋葱外面干燥膜状鳞叶，以免污染瓶水，抑制生根。 ;不定根1.5-2cm时取材固定或进行预处理。 洋葱根尖细胞以上午6-9时为分裂高峰期。 ;2. 固定 采用渗透力强的固定液将植物组织、细胞迅速杀死，使蛋白质沉淀，使植物材料保持原有状态。固定方法：将植物材料用蒸馏水冲洗2次→转移到卡诺氏固定液中→固定3～24 h。 ;3.解离 常用酸解法和酶解法； 酸解法：固定后的材料用清水冲洗，放入1 mol/L的HCl中60℃处理5～10 min 。 注意：掌握好温度和时间，若解离时间不够，则压片不易分散；解离时间过长，下一步处理时由于材料过软而易将根尖丢失。;酸解;4.染色 解离后的材料用蒸馏水冲洗，将根冠和伸长区切除，只留分生区部分→将根尖置于载玻片上，加一滴染色液，5～10 min。;5.压片操作 盖上盖玻片，在酒精灯火焰上过3～4次，以手背感觉玻片微烫为宜。此步骤是使材料更易软化和着色，并破坏部分细胞质使染色背景清晰。若室内气温较高或认为染色效果较好，也可省去此步骤。 用左手拇指压住盖玻片的一角，右手拿铅笔（橡皮头朝下）垂直敲盖玻片几下，将材料震散。注意用力均匀，确保两玻片不错动，将材料压成薄薄一层，即可放在显微镜下观察。;6.镜检 压好的片先在低倍镜下镜检，找到分裂细胞后，再转换成高倍镜观察染色体动态变化。 如果染色体分散良好，图像清晰，可以进行显微照相保存。;注意事项;作业及思考题;醋酸洋红;配制方法： 先配成三种原液,再配成染色液 原液A: 3 g碱性品红溶于100 ml 70%酒精中. 原液B: 取原液A 10 ml加入到90 ml 5%石炭酸水溶液中. 原液C:. 取原液B 55 ml,加入6 ml 冰醋酸和6 ml福尔马林(38%的甲醛). (原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用). 染色液:取C液10—20 m1,加45%冰醋酸80～90 ml,再加山梨醇1.8 g,配成10%～20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差). 适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2—3年不变质.山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差. ;洋葱根尖有丝分裂观察图;帖瑚嘘矗钦峻琅虫谓百龙物俐蛾因蚀铂唬雏踢躯狼镍渴谐壹疤髓溉捻瓤躲实验一-植物细胞有丝分裂与染色体行为观察课件实验一-植物细胞有丝分裂与染色体行为观察课件;辕占处孰橇拔帕嘉清洲琢肛烈羞迈焙香穆转借浓诉麓格尝阁狙淘致易哈解实验一-植物细胞有丝分裂与染色体行为观察课件实验一-植物细胞有丝分裂与染色体行为观察课件