人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的方法探讨_冯年花.pdf

·1662·ChineseJournalofPathophysiology2010,26(8):1662-1664

[]1000-4718(2010)08-1662-03

＊

1,31111122■1■

冯年花,谢安,娄远蕾,阮琼芳,郭菲,杨阳,潘长福,邓志锋,汪泱

123

(,,,330006)

[]:(iPS)(NSCs)。:

iPS4d(EB)(RA)4d,EB

。,RT-PCRiPSNanog、Oc4tSox2

,NSCsNestin、β-tubulinⅢGFAP。

:(1)iPS,Nanog、Oc4tSox2,

EB;(2)RAEB1d,;3d,

rosette,rosette7d。rosette。

rosette,。nestin。

β-tubulinШGFAP。:RAiPS

NSCs。

[];;;

[KEYWORDS]Inducedpluripotentstemcell;sNeuralstemcells;Retinoicacid;Human

[]Q813;R318[]Ado:i10.3969/.jissn.1000-4718.2010.044

(inducedpluripotentstemcell,siPSOlympus。

),2

[1]TM

(embryonicstemcell,sESCs),2.1培基iPS:KnockoutDMEM

。iPS(neural、20%Knockout、1%、1mmol/LL

stemcell,sNSCs)-、0.1mmol/Lβ-、4μg/LbFGF。

,。(retinoicacid,(embryoidbody,EB):bFGFiPS。

RA),iPS:DMEM、10%。

NSCs,iPSNSCs:DMEM/F12,20μg/LEGF,10μg/LbFGF,2%

。B27,10μg/LLIF,2mg/L。

2.2人iPS细胞的传代培iPS10

mg/LC(mouse

1embryonicfibroblas,tMEF),iPS。

1.1细胞系iPS-S,1g/LⅣ15-20min,

[2],3-5mL,,

。

TM。

1.2主要试剂ESCsKnockoutDMEM、

Knockout、DMEM、DMEM/F122.3人iPS细胞向NSCs分化

、、L-、β-、①EBiPS

(basicfibroblastgrowthfacto,rbFGF),30min,,,

Gibco;;β-EB,

tubu