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如何优化mIHC结果：不可忽视的抗体稀释液

在多重荧光免疫组化（mIHC）实验中，选择正确的一抗至关重要，但实验中一些常被忽视的小步骤，如抗体稀释液的选择，实际上对实验成败起着决定性

作用。本文将探讨如何通过选择合适的抗体稀释液来优化mIHC结果。

抗体稀释液的重要性

抗体稀释液不仅影响抗体与靶标的特异性相互作用，还影响抗体的稳定性。常用的稀释液包括PBST、TBST、PBS和TBS等。了解它们的区别对于精准选

择至关重要。

缓冲液组成成分

PBSTNa2HPO4,KH2PO4,NaCl,KCl,Tween-20

PBSNa2HPO4,KH2PO4,NaCl,KCl

TBSNaCl,KCl,Tris-base

TBSTNaCl,KCl,Tris-base,Tween-20

PBS与TBS的区别

1）PBS：基于磷酸盐的缓冲体系，pH稳定性好，但可能与重金属离子形成沉淀，影响部分生化反应。

2）TBS：基于Tris-base的缓冲体系，对生化反应的干扰小，但pH易受环境和稀释倍数影响。

Tween-20在mIHC中的作用

Tween-20是一种非离子型表面活性剂，能增加抗体与组织的接触面积，提高抗体的复性抗原能力，从而增强特异性结合。

抗体稀释液的选择

1）PBS：适用于大多数实验场景，包括洗涤和培养。

2）TBS：对抗体的干扰小，适合作为抗体稀释液。

3）TBST：含有Tween-20，适合作为mIHC实验中的抗体稀释液。

封闭试剂的作用

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封闭试剂，如与二抗同一来源的封闭血清或BSA，可以减少非特异性结合，提高抗体的特异性。如爱必信的多色试剂盒的二抗种属来源就是山羊，那么就

可以用爱必信的山羊血清（货号：abs933）作为封闭剂。

结论

选择合适的抗体稀释液对于获得完美的mIHC结果至关重要。如果您的mIHC结果不尽如人意，建议尝试更换抗体稀释液以优化实验结果。

多色常用试剂推荐：

分类货号产品名称规格

固定abs91794%多聚甲醛（通用型组织固定液）500mL

包埋（冰冻样本）abs9756OCT包埋剂110mL

abs9342Tris-EDTA抗原修复液（10×，pH9.0）100mL

抗原修复（石蜡切片）

abs9248