安徽皖南红豆杉中紫杉醇和多糖的提取与含量测定.pdf

中医药临床杂志 2010年 l0月第 22卷第5期 · 465 · 安徽皖南红豆杉中紫杉醇和多糖的提取与含量测定 李立华 张国升(通讯作者) 安徽 中医学院第一附属医院 安徽合肥 230031 摘 要 目的：对皖南红豆杉中的紫杉醇和多糖的提取、分离并测定其含量。方法：将其树皮粉碎后用无水乙醇提取，采用柱色 谱法进行分离，得到紫杉醇；用水提醇沉方法从红豆杉果实中得到粗多糖，经 Sevag法除去粗多糖中的蛋白质，并采用硫酸一苯 酚法测定多糖含量。结果 ：紫杉醇为6．7mg，产率为0．206％o；多糖为0．316g，产率为 1．54％。结论 ：该方法简便可行。 关键词 红豆杉 紫杉醇 红豆杉多糖 提取 含量测定 红豆杉，学名 Taxuschinensis(pilger)Rehd．；俗称 紫杉，属植物界，裸子植物门，红豆杉纲 (紫杉纲)，红豆 杉 目，红豆杉科，红豆杉属。全世界共有 11种，我国有 4种，1变种，且极少成林。我国红豆杉属植物有：中国 红豆杉，主要分布甘肃、陕西、安徽等省 区，生于海拔 1000—1500m石山杂林。红豆杉属植物为天然的抗癌 药物资源，从 日本紫杉及太平洋紫杉中分离的紫杉醇 在癌症的治疗方面是极有潜力的专利药物。该成分具 有明显的抗癌生物活性，尤其对卵巢及乳腺癌疗效确 切，在临床上对卵巢癌的有效率为48％。此外最近发 现红豆杉枝叶中含有的活性多糖还具有提高免疫、保 护肝脏等功效，对肿瘤也有一定的辅助治疗作用，而 目 前关于红豆杉多糖的研究还未见有其他文献报道。然 而由于该2种成分在植物体内的含量甚微 ，且红豆杉 譬 属植物资源有限，从而限制 了该成分深入研究。为了 开发寻找这2种成分的资源。2007--2008年我们在安 抽滤 徽皖南地区发现一定数量的红豆杉 ，有些树龄较大，并 对其紫杉醇和多糖等成分作了分析，结果说明，皖南红 残渣 豆杉的药用和保健价值是很理想的，具有开发和应用 浓 缩 前景。 实验材料 1 药 材 红豆杉树皮和果实(黄山林区采集)。 2 仪 器 R一205旋转蒸发器 (上海 申胜生物技术有限公 司)，uV一8三用紫外分析仪(无锡科达仪器厂)。KDC 一 2044D低温冷冻离心机 (科大创新股份有限公司)， 缩 W2028数控恒温浴锅 (上海 申胜生物技术有限公司)， 岛津分光光度计(日本)，DZF一2002型真空干燥箱。 I甲醇浓缩，硅胶柱色谱，不同比例的石油醚， 3 试 剂 丙酮梯度洗脱 ，相同流分合并，回收溶剂 紫杉醇对照品(中国药品生物制品检定所，批号 ： 紫杉醇 200803)、葡萄糖标准品以及其化学试剂。 2 紫杉醇的分离 实验方法 称取 1．0gB溶解于少量甲醇中，与100—200目的 l 紫杉醇的提取 硅胶拌和，然后减压蒸除溶剂，采用湿法上柱将粉末装 采集新鲜的红豆杉树皮，用清水洗净，于65~C烘箱 入内径 1．5em的色谱柱中，用石油醚一丙酮洗脱，洗脱 · 466 ·