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TCVMA-禽腺病毒4型ELISA抗体检测方法.pdf

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ICS11.220

CCSB41

团体标准

T/CVMAXXXXX—XXXX

禽腺病毒4型ELISA抗体检测方法

ELISAfordetectionofFowladenovirusserotype-4antibody

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(征求意见稿)

在提交反馈意见时,请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

T/CVMAXXXXX—XXXX

前  言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由中国兽医协会提出并归口。

本文件起草单位:

本文件主要起草人:。

1

T/CVMAXXXXX—XXXX

禽腺病毒4型ELISA抗体检测方法

1范围

本文件规定了禽腺病毒4型ELISA抗体检测方法。

本文件适用于ELISA方法检测鸡血清中的禽腺病毒4型抗体,可以动态监测抗体消长变化,进行疫

病诊断、疫病动态监测及其流行情况的调查。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文

件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单元)

适用于本文件。

NY/T541-2016兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1禽腺病毒4型Fowladenovirusserotype-4,FAdV-4

禽腺病毒4型属于腺病毒科禽腺病毒属中的I群禽腺病毒成员。禽腺病毒4型能引起鸡包涵体肝炎-

心包积液综合征。

3.2ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay

由酶分子与抗体或抗原分子共价结合形成酶标记抗体,此种结合不会改变抗体或抗原的免疫学特

性,也不影响酶的生物学活性。通过此种酶标记抗体与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结

合,当加入底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,从

而出现显色反应,此种显色反应可通过酶标仪进行定量测定,从而通过底物的显色反应来判定有无相

应的免疫反应。

4原理

1

T/CVMAXXXX—XXXX

本文件应用ELISA原理,在酶标板上包被禽腺病毒4型重组Fiber-2蛋白抗原,然后加入待检血

清,如果待检血清中存在禽腺病毒4型抗体,就会与包被的Fiber-2蛋白抗原发生反应。洗涤除去未

结合的成分,再加入辣根过氧化物酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合。再经洗涤

除去未结合的辣根过氧化物酶标记物,加入底物显色液,与辣根过氧化物酶反应形成蓝色产物,显色

深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关。加入终止液终止反应后,产物变为黄色。待检血清中抗体

越多,最终的显色反应就越深,通过酶标仪读数的方式判定待检

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