高效液相色谱测定肉制食品中五种邻苯二甲酸酯.docx

高效液相色谱测定肉制食品中五种邻苯二甲酸酯 资料来源：中国增塑剂网 王美丽，陈海婷，张会娜，郭智勇，魏丹毅 (宁波市新型功能材料及制备科学国家重点实验室培育基地，宁波大学材料科学与化学工程学院，宁波 315211) 摘要:建立了肉制食品中 5 种邻苯二甲酸酯类增塑剂(PAEs)含量的检测方法。样品用正己烷提取，C18 柱分离，柱 温 35.0℃，乙腈-水为流动相梯度洗脱，流速 1.0mL/min，紫外检测波长 226nm。5 种 PAEs 分离特异性好，在 0.02~10μg/mL 之间均具有较好的线性关系，检出限在 4.4~13.8ng/mL 之间，高、中、低 3 水平的回收率均在 79.5%~102.0%之间，相对标准偏差均在 1.1%~14%之间。方法适用于肉制食品中邻苯二甲酸酯类的检测。 关键词：邻苯二甲酸酯；高效液相色谱；肉制食品 食品容器和包装材料增塑剂包括邻苯二甲酸酯类(PAEs)、己二酸酯类(AEs)等。增塑剂与塑料间并没有严密的 化学结合键，故很容易进入环境。近年的研究表明：PAEs 和 AEs 在体内长期累积，可致畸、致癌和致突变[1,2]。因此， 增塑剂的分析检测受到重视，尤以 PAEs 为研究对象居多。目前，PAEs 的检测技术主要采用薄层色谱法[3]、气相色 谱法[4~6]、液相色谱法[7~14]、气-质联用法[15,16],样品处理技术主要有液-液萃取[3,8,14,15]、固相萃取[4,5,9,11,16] 以及固相微萃取[6,7,12,15]等,涉及的基体主要为 PVC 塑料[3,4,6,15]、环境样品(如水、泥土)[5,8,13,16]、组织和血浆 [7,8,10,15]、食品[12,14]等。食品因直接被摄入而危害更大，报道过的研究对象主要包括：水产品、牛奶、食用油等。 肉制食品的脂肪含量高，PAEs 在其中的溶出程度尤为严重，但至今未见相关检测方法报道。 本文以邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸正二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸正二辛酯(DOP)、邻苯二甲酸丁基苄 基酯(BBP)、邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)等 5 种 PAEs 为研究对象,建立了高效液相色谱法测定肉制食品中 PAEs 的方法。方法重现性好，准确度高，可用于肉制食品中此类物质的测定，也可用于生产企业的质量控制。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 戴安 P680C 高效液相色谱仪，包括：P680 型四元梯度泵，TCC-100 型柱温箱，ASI-100 型自动进样器， UVD170U 型紫外检测器，Chromeleon 色谱工作站；AB104-N 型电子天平；XHF-D 型高速分散器；SK-1 型涡旋混匀 器；DS180A 型超声波清洗机；Heraeus Primo R 高速冷冻离心机；D10-12 型氮气吹扫仪；Heal Force PW 超纯水系统。 DEP、DBP、DEHP、DOP 标准品(Sigma-Aldrich)，BBP 标准品(TCI)，乙腈(HPLC 级)、正己烷(Fisher)，水为超纯水。 1.2 色谱条件 色谱柱：Phenomenex Luna C18 柱(250 mm×4.6mmi.d.，5μm)；预柱：Phenomenex C18 柱(4mm×3mm，5μm)；紫外 检测波长；226nm；柱温:35.0℃；进样体积 20μL；流动相：乙腈-水；流速：1.0mL/min；梯度洗脱，步骤如下表 1 所示。 1.3  标准溶液配制 1 分别称取 DEP、BBP、DBP、DEHP、DOP 标准品各 0·0500g，分别用乙腈定容于 50mL 容量瓶中，配 成 1mg/mL 的 5 种 PAEs 的储备液。准确移取 5 种 PAEs 的储备液各 100.0μL，置于同一 10mL 容量瓶中， 用 V(乙腈)∶V(水)=75∶25 的混合溶液定容,配成 10.0μg/mL 的混合标准应用溶液。再用水逐级稀释，配成 2.0、1.0、0.20、0.10、0.020、0.010μg/mL 的混合标准应用溶液。 1.4 样品处理 准确称取已切碎的火腿肠 0.5g 于试管中，加入正己烷 2mL，匀浆，涡旋振摇 3min，超声提取 15min，在-10℃下 10000r/min 离心 10min，取清液；同法再萃取 1 次，合并 2 次清液，45℃下氮气流吹干， 用乙腈 0.5mL 溶解残渣，经 0.45μm 微孔滤膜过滤后，进样。以生产日期不超过 15 天，距离表面 1cm 以 上的内层肉制品作为空白。 2 结果与讨论 2.1 色谱条件的选择 PAEs 在 205、226 和 272nm 处有 3 个特征吸收峰，吸收强度依次增大，但 272nm 处杂峰干扰较多， 综合考虑吸收强度及干扰因素，选择 226n