银杏叶提取物EGb761及米诺环素对实验性自身免疫性脑脊髓炎及多发性硬化的防治分析.pdf

t及米诺环素对实验性 银杏叶提取物EGb76 自身免疫性脑脊髓炎及多发性硬化的防治研究 博士研究生：梁战华 指导教师：贾玉杰 教授 专业名称：病理学与病理生理学 摘 要 背景和目的 Sclerosis，MS)是一种慢性炎性中枢神经系统脱髓鞘性 多发性硬化‘Multiple 疾病，临床主要表现为复发缓解的过程及进行性加重的神经功能障碍。在我国MS 已成为中青年人致残的主要原因之一。 MS病灶的蔫理特征为少突胶质和髓鞘的脱失，并伴有静脉周围的炎性单核细 胞浸润。虽然造藏中枢神经系统髓鞘结构破坏的起始原因尚不明确，但在MS病 灶中发现了炎性细胞浸润提示免疫应答异常参与了中枢神经系统的炎性反应。对 髓鞘抗原的细胞取体液免疫反应的发现、MS和实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE) 在病理学和临床方面的相似性、MS和人类白细胞抗原单倍型的基因相关性以及临 床应用免疫抑带蠛与免疫调节剂治疗有效，均支持MS为一种病因与自身免疫相 关的疾病。 目前，对^晖的治疗主要是针对该病的免疫学成份。在国内，常用于MS的治 疗药物有皮质类羁醇、干扰素0、环孢素A等。 近年来，对MS的治疗有了新的进展，美国食品药物管理局(F工)A)已批准 用于MS治疗的婊调节剂及免疫抑制剂有：干扰素B(IFN t3)、glatiramer乙酸 盐(GA)米托蠢醒(Novantrone)，但这些药物的疗效不十分满意而且价格昂贵， 以及其潜在的哥作用及毒性，迫使我们探索新的方法来限制中枢神经系统的炎症 和脱髓鞘。 标准化银杏-}提取物EGb761为一种从银杏树干燥后的绿叶中纯化出的天然 产物，在临床上西经被应用广泛用于治疗阿尔茨采默(Alzheimer)痴呆、血管闭 塞和耳蜗前庭疾豢。这种制剂由复杂的混合成分组成(即24％黄酮甙和4“％的萜 类生物碱)，分子萤相对较小使其可以通过血脑屏障的阻隔，在中枢神经系统中发 挥药理学活性。 ·1‘ 己知EGb761可以改善脑内注射链脲霉素后大鼠的神经元能量代谢损害：拮抗 谷氨酸盐诱导的神经毒性作用；保护Na+、K％ATP酶的活性，从而抵抗脑缺血保 护脑组织。制荆中的萜类生物成分有调节脑缺血后血流动力学的作用，并能够抑 制血小板活性因子诱导的血小板聚集：另外，已知黄酮类化合物成分具有抗氧化 和自由基清除韵的作用，能够抑制脑缺血后一氧化氮合成酶的活性，故被广泛用 于缺血性脑血管病的症状治疗及康复期治疗。 二甲胺四环素(mmocycline米诺环素)是四环素类第二代抗炎药，有亲多组 织的生物学效应，不管血脑屏障(BBB)是否有炎症，它弥散入中枢神经系统良 好，除了己知的抗微生物的作用外，国外最新研究发现米诺环素显示了多种抗炎 作用，包括抑制基质金属蛋白酶(MMPS)、肿瘤坏死因子(TNF—n)和诱导型一 氧化氮合酶(iNOS)的产生，还可抑制小神经胶质细胞的活性和繁殖。而这些因 素都包含于多发性硬化和实验性自身免疫性脑脊髓炎的病理生理中，因此作为已 证实的抗炎药物还具有神经保护作用，有可能作为复发一缓解型多发性硬化的治 疗药物。 本项研究分基础和I临床两部分 基础研究： autoimmune 实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalencephalomyelitis， EAE)是最有价值的自身免疫模型之一，用于探讨生理性和病理性免疫反应过程 的诸多机制，也是多发性硬化的经典动物模型。 本实验以英国短毛种豚鼠为研究对象，采用新鲜豚鼠脊髓匀浆与完全福氏佐 剂制备成的抗原乳剂，给动物行足底皮内注射，制造EAE动物模型。实验动物随 机分为五组：正常组、模型组、泼尼松治疗组、EGb761治疗组、米诺环素治疗组。 正常组给完全福氏佐剂和生理盐水，模型组给抗原乳剂和生理盐水，其余三组在 给抗原乳剂后当日开始分别用灌冒法给泼尼松O．14m∥1009／日，EGb761 l 麻醉，内眦采血，留取血清，．80。C保存。每日