人牙髓干细胞的无血清培养及其生物学特性.pdf

中国生物制品学杂志2014年 l2月第 27卷第 12期 ChinJBiologicalsDecember2014，Vo1．27No．12 ·1615· 技术方法 人牙髓干细胞的无血清培养及其生物学特性 钟萌，赵奎君，马致洁 首都医科大学附属北京友谊医院药剂科，北京 100050 摘要：目的 使用无血清培养基体外分离培养人牙髓干细胞(dentalpulpstemcell，DPSC)，并分析其生物学特性。方法 分别用有血清培养体系(SCM：含 10％胎牛血清的DMEM)和无血清培养体系(SFM：化学成分明确的、无动物源成分的市 售培养基 MesenCuh—XFmedium)培养人DPSC，倒置显微镜下观察细胞生长、增殖情况及形态特征。细胞传至5代 后，检测两种培养基培养的细胞的增殖能力、免疫表型和分化能力。结果 SFM与SCM培养的细胞形态相似，但 SFM培养的细胞外形显得纤细、细长，立体感更强；SFM与SCM培养的人DPSC有相似的增殖能力 、细胞表型和分 化能力 ，且 SFM培养的人 DPSC成骨和成软骨分化能力更强。结论 本实验表明，SFM能够在体外培养扩增人 DPSC，并维持其干细胞特性 ，包括 自我更新能力(集落形成能力)和多向分化潜能，可取代 FBS用于细胞治疗及生物 医学研究。 关键词：无血清培养基；牙髓；干细胞；细胞增殖 ；表型；分化 中图分类号：R318 文献标识码：A 文章编号：1004-5503(2014)12—1615—05 Serum-freecultureandbiologicalcharactersofhumandentalpulp stem cells ZHONGMeng，ZHAOKuidun，MAZhi-jie DepartmentofPharmacy，BeijingFriendshipHospitalAttachedtOtheCapitalMedicalUniversity，Beijing100050， China Correspondingauthor：MAZhi-jie，E—m~l163．con Abstract：ObjectiveToisolateandculturehumandentalpulpstemcells(DPSCs)invitrobyusingserum-freemedium (SFM)，andanalyzetheirbiologicalcharacters．MethodsDMEM containing10％ fetalbovineSelum wasselectedas sernm．containingserum (SCM)，whilechemicallydefinedcommercialMesenCuh—XFmediumcontainingnocomponents from animaloriginasseurm．freemedium (SFM)．TheculturedDPSCswereobservedforgrowth，proliferationand morphology underinvertmicroscope，then subcuhured forfive passages，and determined for proliferative ability， phenotypeand differentiationability．Results DPSCsculturedinSFM showedasimilarmorphologyasthosein SCM ， whileweremorethin，long and stereoscopic．The proliferationability，phenotypeand