三氧化二砷联合顺铂抑制C6胶质瘤细胞增殖的-中国医药生物技术.PDF

中国医药生物技术 2014 年 6 月第 9 卷第 3 期 Chin Med Biotechnol, June 2014, Vol. 9, No. 3 167 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2014.03.002 ·论著· 三氧化二砷联合顺铂抑制 C6 胶质瘤细胞 增殖的实验研究 王志刚，钟根深，马鹏举，岳双柱，周国胜 【摘要】 果[6-7] 。同时亦有研究发现，As O 脂质体可使更多 2 3 目的 探讨三氧化二砷 （As O ）联合顺铂 （CDDP ）抑制 C6 的 As O 通过血脑屏障，诱导脑胶质瘤细胞凋亡， 2 3 2 3 神经胶质瘤细胞增殖情况及其分子机制。 并具有明显的剂量-时间依赖性关系[8] 。CDDP 在胶 方法 体外实验采用 MTT 法检测对 C6 神经胶质瘤细胞 质瘤的化疗中应用较为广泛，本研究欲通过 As2O3 的抑制率，流式细胞法检测 C6 胶质瘤细胞的凋亡及周期， 与 CDDP 联合应用的体外、体内实验，来探讨临 Western blot 检测 caspase-3 、PTEN 、PI3K 、Akt 蛋白表达 床 As2O3 与 CDDP 联合应用治疗脑胶质瘤的可 水平；体内实验采用免疫组化法检测 caspase-3 、IκB-α 调 行性及其可能的机制；并探讨中西药结合治疗脑胶 控因子的表达，并观察大鼠的生存情况。 质瘤的优势。 结果 As O 、CDDP 及联合应用分别作用于 C6 神经胶质 2 3 瘤细胞 24 h 后的细胞增殖最大抑制率分别为 34.37% 、 1 材料与方法 31.73% 和 76.40% ，其相应药物浓度分别为 12.5 、10.0、 1.1 材料 1.1.1 细胞株及实验动物 C6 胶质瘤细胞由河 （12.5 + 10.0）μmol/L ；两者联用后对 C6 胶质瘤细胞作用 24 h 后的凋亡率分别为从单独用药时的（4.60 ± 1.12 ）%、 南省神经病学研究所提供，常规传代培养；雌性 SD （14.59 ± 0.79）% 提高到（36.13 ± 1.55 ）% ；采用 PI 单 大鼠，体重 150 ~ 200 g ，购自河南省实验动物中心， 染检测的细胞周期也进一步证明了联合用药增加了 C6 细 许可证编号：SCXK （京）2013-0001 ，普通环境饲 养。 胞的周期抑制作用。Caspase-3、PTEN 蛋白在联合组 C6 胶 1.1.2 主要药物和试剂 As O 、CDDP ） 质瘤细胞中表达显著上调，而 PI3K 、Akt 蛋白在联合组 2 3 C6 胶质瘤细胞中表达下调；免疫组化法检测结果显示， 为云南生物谷灯盏花药业有限公司产品；caspase-3、 IκB-α、PTEN 、PI3K 、Akt 单克隆抗体及 ABC 免 caspase-3 调控因子在联合组用药的 C6 胶质瘤细胞中的表 达上调，而 IκB-α 调控因子表达下调；但体内实验表明， 疫组织化学试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有 在 18 d 观察期内各组大鼠的生存期无明显差异（P = 限公司