Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程.doc

Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程 已有 179 次阅读2011-7-17 13:35 起草部门 质检部 被替代文件 新文件 发放编号： 分发部门 质检部 ? 1 ?目的 ??? 制定Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确规范地操作，维护液相色谱仪。 2 ?适用范围 ??? 适用于Agilent1100高效液相色谱仪的使用，维护。 3 ?编写依据 ??? Agilent1100高效液相色谱仪使用说明书 4 ?职责 ??? QC相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。 5 ?内容 5.1? 安全注意事项 ??? 本仪器应良好接地，以防止触电及释放静电；本仪器经常处于高浓度的有机蒸汽环境中，故应通风良好，禁止出现电火花；配制流动相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。 5.2? 仪器组成 ??? 本仪器由LC-10ATVP 泵、7725手动进样器、柱温箱、Agilent1100紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2000或其它工作站)。 5.3? 日常使用操作步骤 5.3.1 ?开机? 打开计算机，进入Windows系统，CAG Bootp Server程序将自动运行。打开HPLC 1100各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功（约1～2min）后，进入Online工作站。 5.3.2? 系统初始化（主要目的：排除系统中的气泡） 5.3.2.1? 打开Purge阀 5.3.2.2? 加大泵流量并开启泵，快速冲洗实验通道，至无气泡从废液管排出。降低流量及溶剂比例成实验初始条件，并单击OK确认执行； 5.3.2.3? 关闭Purge阀，完成系统初始化。 5.3.3? 系统平衡（主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量） ??? 调出本次实验所需方法，保持泵继续工作，以实验初始的流动相冲洗、平衡柱子一段时间。（一般约30min，可自己根据本人的仪器配置情况计算，要求至少以色谱柱几何体积5～10倍体积的流动相冲洗、平衡系统。） 5.3.4? 在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。（一般灯需要20min左右的稳定时间。）点击System On图标，可以同时打开柱温箱和检测器。打开View菜单下的Online Signal窗口，单击Change键，选择需要监测的色谱信号并设定合适的X、Y轴范围，观测色谱基线。 5.3.4? 基线稳定后可以进样分析（经验上，基线波动1～2mAU（常规分析）或1～0.5mAU（痕量分析）就可算是基线稳定。）填写Sample Information 5.3.5? 手动打针进样并切换进样阀 5.3.6? 泵的操作步骤及新旧流动相的更换 5.4? 流速的设定 在初始画面，按func键，光标在“flow”的输入位置闪烁,设定所需流速，按Enter键确认。 继续按func键，设置压力上限和下限，按Enter键确认；继续按Func键至出现Set System Param，输入1为双泵各自单独控制，输入2为双泵联动，且为主泵。 5.4.1? 当使用简单的二元线性高压梯度洗脱时，下面举例说明编写时间程序的步骤（在主泵上编写）： 时间(min) 流动相A(%，V/V) 流动相B(%，V/V) 0 85 15 30 0 100 45 0 100 50 85 15 55 STOP ? ? 5.4.1.1? 初始设定 ??? 通过专用光纤将两个输液泵连接起来，输液管路连接完毕后，设定主泵（A泵）的System Param参数为2, 设定从泵（B泵）的System Param参数为1；设定两泵的ADRS参数为85；设定Local参数为1（本地控制）；设定每台泵的高低压限。A泵设定的值只对A泵有效，B泵设定的值只对B泵有效，设定后，只能用A泵控制B泵。 5.4.1.2? 设定初始条件 ??? 在初始屏幕，按Func键，设定泵A与泵B流速之和；按conc键，设定流动相B的浓度15%，流动相A的浓度为100%-流动相B的浓度%=85% 5.4.1.3? 编写程序 a? 按CE键，返回初始屏幕，按Edit键，屏幕显示已经设定的程序步数和剩余的程序步数； b? 按Enter键，显示参数设定屏幕，光标在Time区闪烁，输入时间数值30分钟，按Enter键。 c? 重复按Func键，直到显示BCNC，使用数字键输入浓度100%（相应地，流动相A的相对浓度为0%），并且按Enter键确认。 d? 按Enter键，光标在Time区闪烁，输入时间数值45分钟，按Enter键。 e? 重复按Func键，直到显示BCNC，使用数字键输入浓度100%（相应地，流动相A的相对浓度为0%），并且按Enter键确认。 f? 按