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miR-652调控猪PYY基因以及PYY基因5’侧翼序列甲基化的研究的开题报告

一、研究背景和意义

前期研究表明，PYY（peptideYY）是一种重要的胃肠激素，能够抑制食欲、促进能量消耗和体重减轻，以及改善2型糖尿病等疾病，因此在医学和养殖方面具有广泛应用前景。然而，目前关于猪PYY基因的调控机制和表达模式等方面的研究还相对较少，尤其是对于非编码RNA（如miRNA）的作用尚不清楚。因此，在深入研究猪PYY基因的调控机制和表达模式的基础上，本研究旨在探讨miR-652在猪PYY基因调控中的作用以及PYY基因5’侧翼序列的甲基化程度。

二、研究内容和方法

（一）miRNA对猪PYY的调控研究方法：

1.筛选差异表达miRNA：利用miRNA芯片或基因测序技术对不同组织或不同情况下的miRNA进行筛选，得到差异表达的miRNA。

2.miRNA靶基因预测：采用miRNA对应的预测数据库进行预测并筛选出潜在的miRNA靶基因。

3.miRNA的表达验证：采用实时荧光定量PCR技术（qPCR）对miRNA进行定量检测和表达验证，根据miRNA的差异表达情况进行筛选。

4.miRNA靶基因的表达验证：对miRNA靶基因进行定量检测和表达验证，探究miRNA对其的作用机制。

（二）PYY基因5’侧翼序列甲基化程度的研究方法：

1.甲基化测序：采用生物芯片或单分子测序技术测定PYY基因5’侧翼序列的甲基化情况。

2.酶切亲和富集甲基化片段：利用酶切亲和富集甲基化片段并测定甲基化程度，以评估PYY基因5’侧翼序列的甲基化状态。

3.分析甲基化与表达关系：通过甲基化水平与PYY基因的表达情况进行分析，并探究PYY基因5’侧翼序列甲基化程度对于基因表达的调节作用。

三、预期结果和意义

预计通过以上方法，可以发现miR-652对于猪PYY基因的调控作用，加深对于PYY基因调控的认识；同时，可以进一步了解PYY基因5’侧翼序列的甲基化程度以及对基因表达调控的影响，揭示PYY基因的表达模式与调控机制，为猪的育种具有一定的理论和实际意义。