流式细胞术在白血病和淋巴瘤中的应用 讲座.ppt

流式细胞术在白血病、淋巴瘤免疫分型中的应用 免疫分型的作用 区分淋系、髓系白血病 区分淋系白血病中的T、B-ALL 鉴定混合细胞性白血病的类型： T-M、B-M、T-B、T-B-M 于治疗过程中监测MRD，评价疗效 提示某些遗传学异常： CD56+APL---t（11；17）？ CD19+AML---t（8；21）（q22；q21）？ 提示预后： CD7、CD11b、CD56等阳性的AML患者预后不良 CD15阳性的AML患者CR率高 免疫分型的原理 正常造血细胞 白血病细胞 抗原表达遵循系列保守性 出现抗原跨系表达 髓系:CD33+,T系:CD7+ 髓系: CD33+ CD7+ 抗原表达有一定的时序性 出现抗原时序混乱表达 原始细胞:CD34+CD11B- 原始细胞:CD34+CD11B+ 各阶段细胞按一定的比例分布 出现分化阻滞 原幼细胞5% 原幼细胞20% 免疫分型需要掌握什么理论知识？ 正常造血细胞的抗原表达规律 不同系列的细胞表达的抗原？ 同一系列不同阶段的细胞表达的抗原？ 每种抗原的表达强度？ 正常B系细胞分化图 正常T系细胞分化图 正常粒细胞分化图 正常单核细胞分化图 免疫分型中的重要抗原CD45 免疫分型常用的抗体 AML CD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO 怀疑M6加做CD71、GPA 怀疑M7加做CD61、CD41 B-ALL CD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a T-ALL CD34、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、 HLA-DR 、CD1a、 TDT、cCD3 NK细胞 CD16、CD56、CD57 浆细胞 CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56 免疫分型的步骤一 第一步：初筛，初步筛选白血病类型 CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45 CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑为T-ALL CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑为AML伴CD7+ CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑为B-ALL CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑为B-ALL伴CD33+ CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑为AML伴CD19+ CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑为AML CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑为APL 免疫分型的步骤二 第二步：确诊，进一步确定白血病类型，并且将某一系别的白血病根据分化程度的不同再分为不同亚型 根据初筛结果加做其他系别特异性标记 T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、 TDT、cCD3 B-ALL: CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a AML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,怀疑M6加做CD71、GPA,怀疑M7加做CD61、CD41 B-ALL免疫亚型 T-ALL免疫亚型 示例：T-ALL初筛CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/- 示例：AML伴CD7+初筛CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+ 示例：B-ALL初筛CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117- 示例：BALL+CD33初筛CD19+CD7-CD33+CD10+CD117- 示例：AML+CD19初筛CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+ 示例：AML初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+ 示例：AML-M3初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR- 示例：AML-M3V初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR- 混合细胞性白血病的免疫分型 双表型：一种白血病细胞同时表达两个或两个以上系列标志。 双克隆型：同时存在两种或两种以上异常细胞，分别表达各自的系列特异性标志。