医学免疫学实验课件.ppt

医学免疫学实验 免疫：指机体事变和排除非己抗原异物，以维护内部环境平衡和稳定的生理功能。其功能包括防御、自身稳定和免疫监视三方面。 第3次 免疫标记技术细胞免疫体外检测 录像（免疫标记技术） ELISA（操作，间接法检测抗-HBs） E-花环试验、淋巴细胞转化试验、大、小吞噬细胞（示教） 免疫：指机体事变和排除非己抗原异物，以维护内部环境平衡和稳定的生理功能。其功能包括防御、自身稳定和免疫监视三方面。 细胞：是一切生物的形态结构和功能活动的基本单位；是构成生物有机体的基本结构单位；是代谢与功能的基本单位；是生物有机体生长发育的基本单位；是遗传的基本单位。 细胞免疫：系指由T细胞介导的免疫反应。现知T细胞表面有免疫球蛋白作抗原受体。 细胞：是一切生物的形态结构和功能活动的基本单位；是构成生物有机体的基本结构单位；是代谢与功能的基本单位；是生物有机体生长发育的基本单位；是遗传的基本单位。 Immunofluorescence, IF 酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) 用酶标记抗原(或抗体)检测抗体(或抗原)。 检测敏感度：ng/ml 固相载体： 聚苯乙烯微量反应板 标记酶 辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶(AP) 酶标仪读OD值 抗体：B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，是介导体液免疫的重要效应分子。 抗原：是指能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。抗原的基本特性有两种：一是诱导免疫应答的能力，也就是免疫原性；二是与免疫应答的产物发生反应，也就是抗原性。 载体：是介导小分子物质转运的另一类膜蛋白，它具有特异性。 反应：活组织接受刺激后发生的功能改变。 Sandwich ELISA indirect ELISA 间接ELISA法检测血清抗-HBs 步骤 加血清及对照 第1孔，阴性对照，加阴性对照血清1滴 第2孔，阳性对照，加阳性对照血清1滴 第3孔，待检血清，加待检血清50?l 第4孔，空白对照 加酶结合物 每孔加入酶结合物1滴（空白孔不加），混匀，封板，37?C 30min 洗板 弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5 sec，甩干，重复3次。 显色 每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C 15min 观察结果 免疫细胞功能检测 E花环形成试验 淋巴细胞转化试验 大、小吞噬细胞