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NEDD9在上皮卵巢癌恶性生物学行为中的作用及机制的初步研究的开题报告

一、选题背景和意义

上皮卵巢癌是女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居女性恶性肿瘤之首。目前，虽然针对上皮卵巢癌的治疗手段已经不断地得到进步，但是其治愈率并不高，主要因为其疾病机制及治疗耐药性尚未完全阐明。因此，深入了解上皮卵巢癌的发病机制以及相关信号通路的调控机制，对于指导疾病的临床治疗具有重要的意义。

NEDD9(神经细胞迁移素血浆膜肽相关酪氨酸激酶底物9)是一种新型的肿瘤相关蛋白，这种蛋白在多种肿瘤中常常出现异常表达，并且与肿瘤细胞的侵袭、转移及预后密切相关。近年来，有研究表明NEDD9在上皮卵巢癌中的表达呈现出明显的增加趋势。

因此，本研究旨在探究NEDD9在上皮卵巢癌中的作用及机制，为寻找新的治疗手段以及指导临床治疗提供理论支持。

二、研究内容和方法

1.研究内容

（1）分析上皮卵巢癌患者的NEDD9表达水平

（2）构建NEDD9基因敲除和过表达的细胞系

（3）细胞增殖和克隆形成实验

（4）Transwell实验

（5）Westernblot检测细胞中相关信号通路的磷酸化水平变化

2.研究方法

（1）采用实时荧光定量PCR、免疫荧光染色、Westernblot等手段，分析人上皮卵巢癌病人和正常卵巢组织中NEDD9的表达水平及其与生存率之间的关系。

（2）使用CRISPR-Cas9技术敲除细胞株内的NEDD9基因，并通过cDNA转染进行NEDD9蛋白的重组。

（3）MTT实验及克隆形成实验来比较不同细胞的细胞增殖能力以及克隆形成能力。

（4）通过Transwell实验评估细胞迁移和入侵活性的差异。

（5）使用Westernblot技术来检测细胞系中信号通路相关蛋白及其在磷酸化水平上的变化。

三、预期结果

（1）NEDD9在上皮卵巢癌中的表达水平明显高于正常卵巢组织。

（2）通过CRISPR-Cas9技术敲除NEDD9基因和重组NEDD9蛋白的细胞系建立成功。

（3）NEDD9的敲除可抑制上皮卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力。

（4）NEDD9的敲除可抑制上皮卵巢癌细胞的迁移和入侵活性。

（5）分析细胞系中相关信号通路的磷酸化水平变化，探讨NEDD9在上皮卵巢癌中的作用机制。

四、研究意义

本研究通过临床病例分析和细胞实验检测手段，探究NEDD9在上皮卵巢癌恶性生物学行为中的作用及机制，阐明其在上皮卵巢癌发生发展过程中的作用，并为改善上皮卵巢癌的临床治疗提供理论指导。