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不同毒力新城疫毒株诱导肿瘤细胞凋亡机制差异分析的开题报告

1.研究背景和目的

新城疫病毒是一种单股阳性RNA病毒，是人和动物（如鸟类和猪类）普遍感染的病原体。近年来，研究表明新城疫病毒在肿瘤治疗方面具有一定的潜力。研究发现，新城疫病毒可以感染并杀死肿瘤细胞，但其毒力与肿瘤细胞种类有关。因此，本研究旨在分析不同毒力新城疫毒株引起肿瘤细胞凋亡的机制差异，为新城疫病毒在肿瘤治疗方面的应用提供理论基础。

2.研究方法和步骤

2.1实验材料

本研究采用肝癌细胞HepG2和口腔鳞状细胞癌细胞OSCC3，分别感染不同毒力的新城疫病毒株（HNC和GZ01）。

2.2实验设计

设一组对照组和三组实验组，分别为HepG2对照组、HepG2实验组、OSCC3对照组和OSCC3实验组。

对照组：细胞不添加新城疫病毒株；

实验组：细胞分别感染HNC和GZ01两种不同毒力的新城疫病毒株，观察细胞生长情况，并分析不同毒力新城疫毒株诱导肿瘤细胞凋亡机制的差异。

2.3实验步骤

2.3.1细胞培养

将HepG2和OSCC3细胞分别培养在10cm培养皿中，分别加入DulbeccosmodifiedEaglesmedium(DMEM)和RoswellParkMemorialInstitutemedium(RPMI1640)混合培养基，含10%胎牛血清（FBS）的增量，体积分数为1%的青霉素/链霉素。细胞在37°C、含5%CO2、处理后分别于0、12、24、36、48和72小时采用酶切分离方法检测细胞生长情况。

2.3.2感染病毒

将HepG2和OSCC3细胞分别感染HNC和GZ01两种不同毒力的新城疫病毒株，随着处理的进行，细胞在37°C、含5%CO2的培养条件下分别于12、24、36、48和72小时采用酶切分离方法检测细胞生长情况和健康细胞的比例。

2.3.3检测细胞凋亡

使用AnnexinV-FITC/PI染色法检测细胞凋亡，采用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡，并通过实时荧光定量PCR（qPCR）检测细胞凋亡相关基因的表达，包括Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9。

3.预期结果与意义

通过本研究，我们预计能够分析不同毒力新城疫毒株诱导肿瘤细胞凋亡机制的差异，了解新城疫病毒在肿瘤治疗中的作用机制。我们的研究对于为新城疫病毒在肿瘤治疗方面的应用提供理论基础具有重要的意义。