遗传病分析3培养细胞染色体制备.ppt

遗传病的分析3

培养细胞的染色体制备在细胞的生长周期中，中期染色体的长短、大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研究。因此利用人工的方法，使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化，并获得之，经处理，制片后观察分析。定义器材细胞株普通光学显微镜冰载玻片酒精灯25%胰旦白酶液1075MKCL2秋水仙素3固定液（冰醋酸/甲醇1:3）4Giemsa染液5试剂收集细胞前6h，培养细胞中加5ug/ml秋水仙素2滴，混匀后继续培养离心1800转/min×10min，弃上清，取沉淀再加入固定液1ml，并与原有的低渗液充分混匀，室温静置5min0.25%胰旦白酶液消化细胞，并收集细胞于离心管中加0.075MKCL低渗液4ml，充分打匀细胞，室温静置20min离心，弃上清，取沉淀010305020406操作操作加固定液5ml，轻轻打匀，室温静置30min离心，弃上清，取沉淀加少量固定液，制成染色体悬液取1-2滴染色体悬液，滴加在冰玻片上，迅速吹片，酒精灯下烤干玻片Giemsa染色5min，自来水冲洗，待干后，显微镜下观察光镜100倍下人染色体G带照片