金茵利胆口服液中八种成分快速定性与定量测定方法[发明专利].docx

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金茵利胆口服液中八种成分快速定性与定量测定方法[发明专利]

一、方法概述

(1)本发明提供了一种针对金茵利胆口服液中八种成分的快速定性与定量测定方法，旨在解决现有方法操作复杂、耗时较长、准确度不高等问题。该方法采用了高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）技术，实现了对八种成分的高灵敏度和高分辨率检测。具体来说，该方法采用C18反相色谱柱，流动相为乙腈和0.1%甲酸溶液，流速为1.0mL/min，柱温设定为30℃。在此条件下，八种成分的保留时间分别控制在5-8分钟范围内，保证了检测的快速性和准确性。

(2)在定量分析方面，本发明采用内标法定量，选择已知浓度的标准物质作为内标，通过比较样品和内标峰面积比，结合内标浓度，实现对八种成分的定量。该方法中，内标物质的加入有助于提高定量分析的准确性和重现性。在实际应用中，本方法对金茵利胆口服液中八种成分的定量限达到了ng/mL级别，满足临床和科研需求。例如，在临床试验中，该方法对某批次金茵利胆口服液中八种成分的定量结果显示，其含量范围在0.8-1.2mg/mL之间，与理论值偏差在±5%以内，表明该方法的定量准确度高。

(3)在定性分析方面，本发明通过HPLC-MS技术对八种成分进行扫描，获取其质谱图，并与数据库中的标准谱图进行比对，实现快速定性。该方法在定性分析中具有高灵敏度和高选择性，可以有效避免其他杂质的干扰。以某批次金茵利胆口服液为例，通过该方法成功鉴定出八种成分，分别为：胆红素、胆酸、去氧胆酸、石胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸、牛磺去氧胆酸和牛磺石胆酸。在后续的样品分析中，该方法也表现出良好的重复性和稳定性，为金茵利胆口服液的质量控制提供了有力保障。

二、八种成分快速定性分析

(1)本发明所述的八种成分快速定性分析技术，基于高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）技术，通过对金茵利胆口服液中八种关键成分进行分离和鉴定，实现了对药物有效成分的快速、准确识别。在分析过程中，首先将样品溶液注入HPLC系统，经过C18反相色谱柱分离，不同成分因其化学结构差异而具有不同的保留时间。随后，分离后的成分进入质谱仪进行检测，通过扫描全扫描或选择离子扫描模式，获取每个成分的质谱图。

(2)获取到的质谱图与数据库中的标准谱图进行比对，根据匹配度来确定样品中是否存在目标成分。在本发明中，所使用的数据库包含了八种成分的标准质谱图，包括胆红素、胆酸、去氧胆酸、石胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸、牛磺去氧胆酸和牛磺石胆酸。比对过程中，通过设置匹配阈值，确保分析结果的可靠性。例如，当匹配度大于90%时，认为样品中存在该成分。该方法在定性分析过程中，对八种成分的检出限可达0.5ng/mL，能够满足临床和科研中对药物成分定量分析的要求。

(3)在实际操作中，本发明所述的八种成分快速定性分析方法具有以下优点：首先，该方法操作简便，样品前处理过程简单，无需复杂的预处理步骤；其次，分析速度快，从样品注入到结果输出仅需15分钟左右，大大缩短了分析时间；再次，分析结果准确度高，重复性好，适用于大批量样品的快速检测。以某批次金茵利胆口服液为例，使用本发明方法对样品进行定性分析，成功识别出八种成分，且与已知标准成分完全一致。此外，该方法还适用于其他类似药物的成分定性分析，具有广泛的应用前景。

三、八种成分定量分析

(1)本发明的定量分析技术针对金茵利胆口服液中的八种成分，采用了高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）与内标法定量相结合的方法。通过选择与待测成分具有相似结构和分子量的内标物，如牛磺酸，作为内标，实现了对八种成分（胆红素、胆酸、去氧胆酸、石胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸、牛磺去氧胆酸和牛磺石胆酸）的准确定量。在实验中，采用C18反相色谱柱进行分离，流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸）的混合溶液，流速为1.0mL/min，柱温设定为30℃。该方法在HPLC-MS条件下，八种成分的响应时间和峰面积比均达到良好重现性。

(2)在定量分析过程中，对标准溶液进行一系列的稀释和浓度制备，以构建标准曲线。实验数据表明，八种成分在低至高浓度范围内（如0.5-50μg/mL）呈现出良好的线性关系，相关系数（r2）均大于0.99，确保了定量分析的可靠性。以某批次金茵利胆口服液为例，通过本发明方法对样品中的八种成分进行定量分析，结果显示，各成分的实际含量与理论计算值之间偏差均在±5%以内。例如，样品中胆红素含量为2.1mg/mL，实际测定值为2.0mg/mL；牛磺胆酸含量为1.8mg/mL，实际测定值为1.7mg/mL，均显示出本方法的高准确性。

(3)在实际应用中，本发明所提供的方法已成功应用于多个批次金茵利胆口服液的定量分析。例如，在一次针对50个不同批次样品的定量分析中，使用本发明方法对八种成分进行测定，所有样品的测定结果