实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定.ppt
不规那么抗体筛选与鉴定
及抗体效价检测;一、不规那么抗体筛选与鉴定
目的:检测有临床意义的不规那么抗体
原理:受检血清+筛选细胞〔一组3人份〕筛选
受检血清+谱细胞〔一组10人份〕鉴定
方法:①盐水法②聚凝胺法③抗人球法
器材:小试管、滴管、试管架、记号笔、冰箱、离心机、
37℃水浴箱
试剂:筛选细胞、谱细胞
标本:血清或血浆;1.筛选
⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c
⑵加样:受检血清2滴+上述细胞1滴检测
⑶观察结果:阳性进行不规那么抗体鉴定
⑷测抗体效价〔室温、4℃10min、恢复室温10min、37℃3min〕;2.鉴定;本卷须知
1.筛选细胞凝集〔盐水法、聚凝胺法、抗人球法〕,要鉴定抗体特异性。
2.谱细胞凝集程度试管集中比照观察1+w、1+、1+s。
3.自身凝集与否要进行观察。
4.盐水中有凝集可能为:有格局〔抗-M、抗-P〕;无格局〔抗-I、抗-HI〕。无凝集用凝聚胺法或抗人球法,以检查有无IgG抗体。;二、血型抗体效价测定〔IgM、IgG〕;实验步骤
1.标记管号:1、2、4、8、16、32……
2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul
3.加血清:1、2管各加血清
4.倍比稀释:将2号管混匀,从中吸出50ul移入
第3管,混匀;再从第3管吸出50ul移入第4
管,以此类推,至最后一管,吸出50ul弃去。
5.加悬红:每管各加50ul,混匀。
6.3000r/min离心15秒,直接观察结果、
4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。;本卷须知
1.更换滴管,防止干扰
2.防止前带现象,看结果从高稀释度开始
3.试剂细胞
4.稀释液体积越小,产生误差越大;思考题