神经干细胞培养及鉴定.pdf

第 1 卷第 1 期 神经药理学报 Vol. 1 No. 1 2011 年 2 月 Acta Neuropharmacologica Feb. 2011 神经干细胞球和单层贴壁神经干细胞的 培养及鉴定 郝军荣 张 丽 秦正红 215123 苏州大学基础医学与生物科学学院衰老与神经疾病实验室，苏州， ，中国 【摘要】 目的：探讨小鼠大脑皮层源性神经干细胞 (NSCs) 体外培养的两种方法并对培养的细胞进行鉴定。方 法：分别取孕 14~16 d 的昆明小鼠胚胎脑皮质并用细胞球悬浮培养和单层贴壁培养两种方法进行体外培养，用 光学显微镜观察 NSCs 的生长情况，并用免疫细胞化学鉴定 NSCs 特异性抗原的表达，经过血清对 NSCs 分化 诱导后进行胶质纤维酸性蛋白及微管相关蛋白 -2 的检测。结果：①培养出来的细胞可以扩增生长；②这两种方 法分别培养的神经干细胞球和单层神经干细胞经抗巢蛋白免疫细胞染色均呈阳性；③两种培养方法培养出的 NSCs 经诱导分化后，免疫细胞化学染色显示微管相关蛋白 -2 、神经胶质酸性蛋白染色阳性。结论：采用无血清 培养基中加入特定生长因子的神经干细胞球培养和单层贴壁两种培养技术，可培养出在体外稳定增殖并有多向 分化潜能的 NSCs 。 【关键词】 大脑皮层；神经干细胞；神经干细胞球；单层贴壁培养 【中图分类号】 R329.29 【文献标识码】 A 文章编号：2095-1396 （2011）01-0051-005 Cultivation and Identifi cation of Neural Stem Cells Cultivated by the Methods of Neurospheres and Adherent Monolayer Cells HAO Jun-rong ，ZHANG Li ，QIN Zheng-hong Laboratory of Aging and Neurological Diseases ，Department of Pharmacology ，Suzhou University School of Medicine ，Suzhou ，215123 ，China 【ABSTRACT 】 Objective ：To explore two methods of culturing mouse embryo neural stem cells in vitro and identification of their differentiation. Methods ：The neural stem cells were derived from the cortex tissue of mouse embryo at gestation day of 14~16 with two methods: culturing of neurosphere in floating and culturing of monolayer adherent cells.To observe the development of the neural stem cell ，the expression of the stem cell marker Nestin and the