硫利达嗪对乳腺癌细胞MDA-MB-231与MCF-7的杀伤效应.pdf

·452 · 安徽医科大学学报　 Acta Universitatis MedicinalisAnhui　 2015 Apr;50(4) 硫利达嗪对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7 的杀伤效应 1 1 1 2 1 1 童斯浩 ,汪　 毅 ,龚　 理 ,钱振珏 ,柯章敏 ,鲍扬漪 摘要　 目的　 观察硫利达嗪对人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 用于以后的肿瘤临床治疗。 该研究以硫利达嗪作用 和MCF-7 的凋亡作用,并探讨其机制。 方法　 采用 MTT法 于三阴乳腺癌 MDA-MB-231 细胞和乳腺癌 MCF-7 测定硫利达嗪对细胞的抑制作用,计算半数抑制浓度 细胞,观察其对乳腺癌细胞的周期变化及凋亡发生 (IC );流式细胞术检测硫利达嗪对细胞周期分布和凋亡的 50 的影响,为乳腺癌的综合治疗提供实验依据,为临床 影响;比色法测定药物对细胞 Caspase-3 活性的影响;West- 研究奠定基础。 ern blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax表达的变化。 结果 　 硫利达嗪作用24 h后,MDA-MB-231、MCF-7 细胞增殖明 1　 材料与方法 显呈剂量依赖性抑制,其IC 为18、22 μmol/ L。 流式细胞术 50 1.1　 材料 结果显示,随着加入硫利达嗪浓度的提高,MDA-MB-231、 MCF-7细胞均发生不同程度的G/ G 期阻滞、细胞凋亡程度 1.1.1　 主要仪器　 FACS Calibur 流式细胞仪购于 0 1 增加及伴随胞内Caspase-3活性增加。 各实验组与对照组比 美国BD 公司;680 全自动酶标仪购于美国 BIO- 较,差异均有统计学意义(P0．01)。 Western blot法结果显 RAD公司;8000DH 型二氧化碳培养箱购于美国 示随着药物浓度的增加,抗凋亡蛋白Bcl-2 表达下调、促凋 Thermo公司;CKX41 型倒置显微镜购于 日本 O- 亡蛋白Bax表达明显上调,各实验组与对照组相比,差异有 LYMPUS公司。 统计学意义(P 0．01)。 结论　 硫利达嗪对乳腺癌细胞 1.1.2　 实验药物与细胞株　 硫利达嗪购自美国 MDA-MB-231、MCF-7有显著的增殖抑制作用且可显著诱导 Gibco公司;乳腺癌 MDA-MB-231、MCF-7 细胞株购 肿瘤细胞发生G/ G 期阻滞及凋亡,伴随Caspase-3 活性的 0 1 自中国科学院上海细胞库,本实验室传代保存。 上调,其毒性机制可能与肿瘤细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2 下 1.1.3　 主要试剂　 高糖 DMEM培养基、青霉素 - 调、Bax上调有关。 链霉素双抗、含乙二胺四乙酸 (EDTA)胰酶、二甲基 关键词　 乳腺癌;硫利达嗪;周期;凋亡;Caspase-3;Bcl-2;Bax 亚砜(DMSO)、胎牛血清购于美国Gibco公司;流式 中图分类号　 R737．9;R971.41 抗体Annexin V-FICT/ PI双染细胞凋亡检测试剂盒、 文献标志码 A 文章编号 1000-1492(2015)04-0452-07 细胞周期检测试剂盒、Caspase-3 活性检测试剂盒购 　 　 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病