【2017年整理】植物组织培养复习习题.doc

绪论 课后讨论题： 1、对植物组织培养技术的展望。 2、植物组织培养发展史的各个时期，有哪些主要的培养技术获得成功？ 课外作业题： 1、什么叫植物组织培养技术？它有哪些类型？其理论依据是什么？ 植物组织培养的概念可以分为广义和狭义。）离体离体培养如分生组织、表皮组织、薄壁组织等callus）进行离体培养的技术。植物组织培养主要有组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养及原生质体培养，目前，由这方面的研究类型又延伸出多种应用领域的研究工作。植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。(embryoid)，由胚状体直接重建完整植株，或制成人工种子后再重建植株。 愈伤组织再分化时，可经过两条途径，一是由愈伤组织的部分细胞先分化产生芽（或根），再在另一种培养基上产生根（或芽），形成一个完整的植株，因为芽和根都是植物体的器官，所以这一过程叫器官发生途径。二是在愈伤组织中产生出一些与种子中的胚相似的结构，即同时形成一个有苗端和根端的两极性结构，然后再在另一种培养基上同时发展成带根苗，由于这一过程与种子中胚的形成和种子萌发时形成幼苗的过程相似，所以叫做胚状体发生或无性胚胎发生。 3、试述目前植物组织培养的应用。 植物组织培养研究领域的形成，不仅丰富了生物学科的基础理论，还在实际应用中表现出巨目前，该领域的研究成果主要应用于植物离体快繁、无病毒苗木培育、培育新品种或创制新物种、次生代谢物生产、种质资源保存及人工种子。植物离体快繁植物离体快繁是植物组织培养在生产上应用最广泛、产生较大经济效益的一项技术。离体快无病毒苗木培育 很多农作物都带有病毒，特别是无性繁殖植物，如马铃薯、甘薯、草莓、大蒜等，病毒在体内积累，影响其生长和产量，对生产造成极大损失 （3） 培育新品种或创制新物种 应用植物组织培养的理论和技术，可以加速育种进程，培育新品种或创制自然界中的新物 A 培育远缘杂种 受精后障碍导致远缘杂交的植物不孕，使得植物的种间和远缘杂交常难以成功。采用胚的早通过原生质体的融合，可以克服有性杂交不亲和性，从而获得体细胞杂种，创制出新物种或新B离体 培养的细胞无论是愈伤组织还是悬浮细胞，由于处在分裂状态，易受培养条件和诱变因素(如)的影响产生变异，从中可以筛选出对人类有用的突变体，从而育成新品种。C 单倍体育种 基因型可快速纯合单倍体育种已成为一种新的育种手次生代谢物生产利用组织或细胞的大规模培养，可以生产人类需要的一些天然有机化合物，如蛋白质、脂植物种质资源的离体保存 种质资源(germplasm)是农业生产的基础，而自然灾害、生物间竞争及人类活动等已造已有许多种植物在离体条件下，通过抑制生长或超低温贮存的方人工种子 植物组织培养基由于含有高浓度蔗糖，能供养很多微生物如细菌和真菌的培养基的灭菌A高压蒸汽灭茵法 在使用高压灭菌锅时，应注意以下几点：①使用高压锅前应添加足够的水；②锅内气压太高(超过152×105Pa)会引起部分有机物B过滤除法当培养基中含有 （2） 器具的灭菌 A干热灭菌法干热灭菌法是将器具长时间放在高温下消除杂菌的一种方法。其具体做法(玻璃器皿或器械)先用铝箔包好，放入温度设定为150℃的恒温干燥箱2h，取出冷却后便可以使用。 B高压蒸汽灭茵法高压蒸汽灭菌法是将需灭菌的玻璃器皿、器械或培养基等放在高压蒸一般1.06 kg／cm的压力下(121 ℃)下保持15～20min，就对于无菌操作所用的各种器械，如镊子、解剖刀、解剖针等，一般95％酒精中浸一下，然后再置火焰上灼烧，待冷却后 第一步刷洗、冲洗采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细弄干 第二步是用洗衣粉水或肥100m1水加12角匙的量配5分钟，然后再用自来水冲净洗衣粉水。用洗衣粉浸洗过的材料，可以除去轻度附着在上面的污物，(大小视材料多)或广口瓶内、外表面用70％酒精棉球擦拭作表(已开机10分钟)或已灭好菌的接种箱内，再把处理好的植物材料置入，同时在持续消毒的时间内不时用溶液充分接触，驱除气泡，使彻底。在快到预定时1～2分钟，即开始把消毒溶液倒入另一准备好的大烧杯 使用浓度(％) 持续时间 (分钟) 去除的难易 效果 次氯酸钙 次氯酸钠 过氧化氢(双氧水) 溴水 硝酸银 氯化汞(升汞) 抗生素 5～10 2 10～12 1～2 1 0.1～1 4～50ppm 5～30 5～30 5～15 2～10 5～30 2～15 30～60 易 易 最易 易 较难 较难 中 很好 很好 好 很好 好 最好 比较好 多70％酒精作短暂灭菌，一10～30秒左右， 要根据植物材料对灭菌剂的敏感性来选用不同的药剂，确定适宜的处理时间和水洗的次数。次氯酸钠和次氯酸钙都是利用分解产生氯气来杀菌，故灭菌时用广口瓶加盖或带螺旋盖的其它广口