牛人工授精技术.ppt
精子生存时间和生存指数的测定精子生存时间:指精子在某温度下在体外的总的生存时间。生存指数:将精液在某温度下,每隔8~12小时检查一次精子活力,直至无活动精子为止,相邻两次检查的平均活力与间隔时间的积之和为生存指数。第31页,共65页,星期日,2025年,2月5日PH测定正常精液PH:牛、羊6.5~6.9、猪、马7.4~7.5同种精液PH偏低的,品质较好,PH偏高的受精率、生活力和保存效果都显著降低。第32页,共65页,星期日,2025年,2月5日美蓝褪色试验第33页,共65页,星期日,2025年,2月5日精液稀释稀释的目的稀释液的成分及作用稀释液的配制方法稀释倍数的确定稀释方法第34页,共65页,星期日,2025年,2月5日稀释的目的大精液容量,增加了一次采精量的可配母畜数。延长精子存活时间。有利于精液的保存和运输。第35页,共65页,星期日,2025年,2月5日稀释液的成分及作用
稀释剂:单纯扩大容量的等渗液。0.9%NaCl、5%葡萄糖。营养剂:主要提供营养,以补充精子在代谢过程中消耗营养。(1)奶类:奶粉(脱脂、速溶)10—12%;鲜奶经消毒加入10—20ml。(2)卵黄,通常加入20%。(3)糖类,3%葡萄糖,11%蔗糖。保护剂:主要保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。(1)非电解质或弱电解质:降低精液电解质浓度,常用糖类、氨基乙酸。(2)缓冲物质:维持精液的PH,常用柠檬酸盐、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾和三羟甲基氨基甲烷(tris)等。(3)防冷物质:防止精子发生冷休克,常用卵黄、奶类。(4)抗冻物质:甘油、二甲基亚砜(DMSO)。(5)抗菌物质:青霉素、链霉素、氨基苯磺胺。其他添加剂:激素类、维生素、酶类、染料类、有机酸、精氨酸等。第36页,共65页,星期日,2025年,2月5日稀释液的配制要求药物原料应选用化学纯和分析纯制剂。用具须洗净消毒。药品用蒸馏水溶解后,要进行过滤和水浴消毒。蒸馏水要新鲜。卵黄要取自新鲜鸡蛋。最好现用现配,卵黄、奶类、抗生素现用现加。第37页,共65页,星期日,2025年,2月5日稀释倍数的确定一头公牛一次采得鲜精12毫升,经检查精子活力为0.7,密度为11亿/毫升,如为母牛输精时要求有效精子数不少于0.1亿,输精量为0.25毫升,本次采得的精液可为多少头母牛输精?(1)每毫升原精液中有效精子数:11*0.7=7.7亿/毫升(2)稀释后每毫升精液中有效精子数:0.1/0.25=0.4亿/毫升(3)稀释倍数:7.7/0.4=19.25取19倍(4)可配母牛头数:12*19/0.25=912头第38页,共65页,星期日,2025年,2月5日稀释方法将精液精液与稀释液同处在30℃的环境中。检查精液品质,确定稀释倍数。稀释时,将稀释液沿着精液容器的壁慢慢加入精液中,同时慢慢转动精液瓶,使之混匀。如需高倍稀释,应先做3—5倍的低倍稀释。第39页,共65页,星期日,2025年,2月5日精液稀释第40页,共65页,星期日,2025年,2月5日精液保存常温保存:15—25℃低温保存:0—5℃冷冻保存:保存在液氮(-196℃)或干冰(-79℃)中。第41页,共65页,星期日,2025年,2月5日液氮及其容器液氮的特性:超低温性、易挥发性、抑菌性。利用液氮:防冻伤、防窒息、防爆炸液氮罐:第42页,共65页,星期日,2025年,2月5日液氮罐的构造第43页,共65页,星期日,2025年,2月5日液氮罐的使用购买时要检查合格证,查看各部件是否齐备完好,测定液氮损耗率是否正常。运输液氮要有专门的车辆,防止剧烈振荡。贮存液氮要在专门的室内。当液氮量达容积的1/3时要及时充氮。每年要清洗保养一次第44页,共65页,星期日,2025年,2月5日精液的冷冻保存原理玻璃化假说:稀溶液在冰晶化温区(0~-60℃)易形成冰晶,冰晶为分子有序排列、形态规则、颗粒较大的固体,可对精子产生渗压和机械危害。如溶液快速降温,则形成分子无序排列、颗粒较小的玻璃化固体,对精子危害小,再以同样的方式升温,精子即会恢复活力。第45页,共65页,星期日,2025年,2月5日细管冻精的生产程序采精及精液品质检查精液稀释:二次稀释法降温平衡:分装冻结:液氮熏蒸浸泡法抽样检查第46页,共65页,星期日,2025年,2月5日关于牛人工授精技术第1页,共65页,星期日,2025年,2月5日人工授精的概念种畜配种:自然交配、人工授精人工授精是指利用器械采取公畜的精液,经过适当的检查和处理,再用器械把精液输送到母畜生殖道的适