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DcR3siRNA对结肠癌SW480细胞裸鼠原位移植瘤模型的作用研究的开题报告

研究背景

结肠癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是致死率较高的癌症之一。尽管手术、放疗和化疗等治疗方法已经得到了快速发展，但结肠癌的治疗仍然存在一定的局限性。因此，寻找新的治疗方法和药物对于控制结肠癌的发展和治疗是至关重要的。

DcR3是一种具有细胞保护和细胞抗凋亡作用的细胞生长因子，其与多种肿瘤的发病和发展密切相关。因此，DcR3的拮抗剂可能成为一种有潜力的治疗结肠癌的策略。

研究目的

本研究的目的是探讨DcR3siRNA对结肠癌SW480细胞裸鼠原位移植瘤模型的作用。具体目标如下：

1.利用siRNA技术成功降低SW480细胞中DcR3的表达。

2.建立裸鼠原位移植瘤模型，并注射DcR3siRNA。

3.观察DcR3siRNA对SW480细胞裸鼠原位移植瘤模型的治疗效果。

4.探讨DcR3siRNA对裸鼠免疫系统的影响。

研究方法

1.细胞培养及转染DcR3siRNA

首先，将SW480细胞培养在含有10%FBS的DMEM培养基中，经过离心后进行重悬。然后，利用TransIT-siQUEST转染试剂将DcR3siRNA转染入SW480细胞中。转染完成后，利用Westernblot检测DcR3的水平。

2.裸鼠原位移植瘤模型的建立

首先，在裸鼠体内种植SW480细胞子集（1×106），并让其生长到一定程度（约2周）。接着，将DcR3siRNA注射到裸鼠体内（每只鼠注射2μgsiRNA），连续注射3次，每隔一周一次。在注射DcR3siRNA之前和注射后每3天观察裸鼠肿瘤的体积和体重的变化。

3.对裸鼠免疫系统的影响

在注射DcR3siRNA之后，采集裸鼠血样，并随机将其分成两组。其中一组使用ELISA法检测裸鼠血液中的促炎症因子的水平；另一组采用M1/M2巨噬细胞比例的流式细胞术检测裸鼠巨噬细胞分化的情况。

预期结果

1.通过siRNA技术成功降低SW480细胞中DcR3的表达。

2.成功建立裸鼠原位移植瘤模型，并观察到DcR3siRNA对SW480细胞裸鼠原位移植瘤模型有一定的治疗效果。

3.探讨DcR3siRNA的免疫影响，如降低裸鼠体内促炎症因子水平和改善巨噬细胞的分化状态。

意义

本研究将为探讨DcR3siRNA在治疗结肠癌中的应用提供实验支持。同时在探讨DcR3siRNA治疗结肠癌的同时，我们也将探究DcR3siRNA对裸鼠免疫系统的影响，有助于了解免疫系统在结肠癌治疗中的作用。