正常人外周血αβ+T细胞TCR+β链CDR3多态性和长度分析.pdf

ISSN1007—7626 中国生物化学与分子生物学报 2007年6月 !!!!：!!：!!竺 鱼垦!竺星塑曼婴翌生笪望塑垦曼堡塾翌塑生塑坐婴!坚里i垒!竺眨 竺!!!!!!!二!!! 正常人外周血仅p 胡云良1净， 杨介钻纠， 倪 莉¨， 姚新生3’ (1’温州医学院附属第二医院检验科，浙江温州325027；2’浙江大学医学院附属第一医院传内科 浙江杭州 310003；3’遵义医学院免疫学研究室，贵州遵义563003) 摘要采用免疫扫描谱型分析技术，分析正常人外周血T细胞TCR8链CDR3的多态性和长度分 bloodmononuclear 布．提取6例正常人外周血单个核细胞(peripheral cell．PBMC)的总RNA，逆转录成 eDNA，以24个TCRBV基因家族为上游引物，共同的TCRBC基因为下游引物(荧光标记)，6例样 品PCR产物的基因扫描分析表明，24个TCRBV家族的CDR3谱型分析在1．5％琼脂糖凝胶电泳图 上显示1个模糊条带．序列测定结果显示，各TCR 分析证明，正常人外周血T细胞的24个TCRBV家族的CDR3谱型为标准的高斯分布，各家族的 CDR3表达频率相近，呈现不同的CDR3多态性和不同的CDR3长度．多数TCRBV家族产物为框架 内重排(相邻2个PCR产物相差3个碱基)，少数TCRBV家族表现为两个峰群的重排．该研究对正 常人TCR0链CDR3谱系的详细分析将为T细胞应答、TCR重组等研究提供基础．利用免疫谱型分 析技术能监测到TCRCDR3谱型分布特征和表达频率的变化． 关键词 T淋巴细胞受体；互补决定区3；免疫扫描谱型分析；基因扫描 中图分类号R392．12 of and ofTCRbetaChain AnalysisPolymorphismLength CDIb in TCellsof Donors SpectratypingPeripheralBlood仅p Healthy HU Jie—Zuan2’，NiLil’，YAO Yun．Lian91’。，YANG Xin—Shen93’ Second toWenzhouMedical Medicine，The 325027； (”DepartmentofLaboratory HospitalAffiliated College，WenzhouZhejiang ”DepartmentofInfectiousDiseases，FirstAffiliatedHospital，SchoolofMedicine，ZhejiangUniversity， ofImmunology，Zu，百Medical563003，Guizhou，China) HangzhoHZhejinng310003；3’Deportmeat College，Z“mi AbstractThe ofthis wasto the and oftheTCRbetachain objective study analyzepolymorphismlength CDR3 of cellsfrom dono